典型文献
,斑丹毒丝菌SpaA的分段克隆及表达
文献摘要：
为筛选表达量高且免疫原性强的红斑丹毒丝菌表面保护性抗原A(SpaA)的抗原片段,本研究根据该菌SpaA的结构和功能区将其设计为6个子片段和1个全长片段,采用PCR技术从红斑丹毒丝菌HG-1菌株中扩增出SpaA的7个抗原基因片段,利用原核表达系统克隆并表达后采用SDS-PAGE和western blot检测表达及纯化情况.结果显示,获得7个重组蛋白,分别命名为rSpaA1～rSpaA7,其表达量占菌体总蛋白的17.44％～25.38％,其中rSpaA1、rSpaA2、rSpaA5以包涵体形式表达,rSpaA3以可溶性蛋白形式表达,而rSpaA4、rSpaA6、rSpaA7两种表达形式同时存在.纯化后,rSpaA1～rSpaA7的纯度介于84.22％～93.72％,浓度为0.89 mg/mL～3.25 mg/mL.Western blot 结果显示,7个重组蛋白均显示出良好的反应原性,其中rSpaA1、rSpaA3、rSpaA4的反应原性更强.本研究实现了对红斑丹毒丝菌SpaA的分段及其全长的表达和纯化,为SpaA保护性抗原片段的筛选及猪丹毒亚单位疫苗的研发奠定基础.
文献关键词：
红斑丹毒丝菌;SpaA蛋白;表达;纯化;western blot
中图分类号：
作者姓名：
马艳杰;戚百川;裴世璇;薛云;司丽芳;王臣;刘志军;赵战勤
作者机构：
河南科技大学动物科技学院/兽医生物制品工程实验室,河南 洛阳 471003;河南科技大学动物科技学院/河南省高等学校环境与畜产品安全重点学科开放实验室,河南 洛阳 471003
文献出处：
引用格式：
[1]马艳杰;戚百川;裴世璇;薛云;司丽芳;王臣;刘志军;赵战勤-.,斑丹毒丝菌SpaA的分段克隆及表达)[J].中国预防兽医学报,2022(01):16-21
A类：
SpaA,rSpaA1,rSpaA7,rSpaA2,rSpaA5,rSpaA3,rSpaA4,rSpaA6
B类：
免疫原性,红斑丹毒丝菌,表面保护,保护性抗原,原片,究根,结构和功能,功能区,全长,长片,HG,原基,原核表达,表达系统,SDS,PAGE,western,blot,重组蛋白,菌体,体总,总蛋白,包涵体,可溶性蛋白,表达形式,反应原性,猪丹毒,亚单位疫苗
AB值：
0.222981
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