典型文献
基于蛋白质结构预测的胰岛素样生长因子-1的制备及活性分析
文献摘要：
为了更经济高效地制备胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1),本研究采用计算机模拟技术对3种IGF-1融合蛋白进行蛋白质结构预测与分子对接,筛选出酶切最适配的IGF-1融合蛋白表达形式.利用基因工程技术构建并鉴定了 IGF-1融合蛋白原核表达载体,并转化大肠杆菌Origami B(DE3)菌株,获得重组子;经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达后,对菌体的破菌上清进行亲和层析、脱盐、凝血酶酶切及酶切产物亲和层析纯化得到目的蛋白;通过3T3细胞增殖法建立活性评价体系并对获得的IGF-1进行活性测定.结果显示,构建的IGF-1融合蛋白原核表达载体序列正确,获得的重组子在25℃、0.05 mmol/L IPTG诱导16 h时融合蛋白为可溶性表达,经初步纯化、凝血酶酶切、再次纯化后可获得纯度大于90％的IGF-1目的蛋白,在建立的活性评价体系下测得制备的IGF-1比活为2.47×105 U/mg,与市售标准品接近.本研究建立了 一条用于制备IGF-1的完整工艺路线,为IGF-1药物的研制及工业化生产奠定基础.
文献关键词：
胰岛素样生长因子-1;虚拟预测;基因重组;活性分析
中图分类号：
作者姓名：
谢倩;李冠霖;李颖;李佳楠
作者机构：
江汉大学生命科学学院,湖北武汉430056;武汉海特生物制药股份有限公司技术中心,湖北武汉430056
文献出处：
引用格式：
[1]谢倩;李冠霖;李颖;李佳楠-.基于蛋白质结构预测的胰岛素样生长因子-1的制备及活性分析)[J].生物工程学报,2022(06):2259-2268
A类：
虚拟预测
B类：
蛋白质结构预测,胰岛素样生长因子,活性分析,insulin,like,growth,IGF,计算机模拟技术,分子对接,融合蛋白表达,表达形式,基因工程技术,技术构建,蛋白原,原核表达载体,大肠杆菌,Origami,DE3,异丙基,吡喃,半乳糖,糖苷,isopropyl,thiogalactopyranoside,IPTG,诱导表达,菌体,上清,亲和层析,脱盐,凝血酶,层析纯化,目的蛋白,3T3,活性评价,活性测定,可溶性表达,市售,标准品,工艺路线,工业化生产,基因重组
AB值：
0.352706
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