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呋喃唑酮代谢物人工抗原的制备与鉴定
文献摘要：
制备了呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑烷酮(AOZ)的人工抗原,再采用重氮法将AOZ衍生物2-NP-AOZ与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,制备免疫原2-NP-AOZ-BSA和包被原2-NP-AOZ-OVA,通过SDS-PAGE、MALDI-TOF-MS分析其偶联效果.以2-NP-AOZ-BSA皮下注射免疫SPF级BALB/c小鼠,分别于3次免疫和5次免疫后制备血清,以间接ELISA检测血清中2-NP-AOZ抗体效价,间接竞争ELISA检测血清敏感性,鉴定其免疫原性.发现2-NP-AOZ分别与BSA和OVA偶联成功,获得免疫原2-NP-AOZ-BSA和包被原2-NP-AOZ-OVA;MALDI-TOF-MS分析测得偶联率分别为7.1:1、3.8:1;BCA试剂盒检测2-NP-AOZ-BSA、2-NP-AOZ-OVA的浓度分别为4.9、5.2 mg/mL.间接ELISA检测3次免疫后小鼠血清抗体效价均达1:16000及以上,5次免疫后血清抗体效价均达1:32000及以上;半数抑制浓度(IC50)为34.43 ng/mL,人工抗原2-NP-AOZ-BSA免疫原性优良.本研究成功合成了AOZ完全抗原,为AOZ单克隆抗体制备及快速检测方法的建立奠定了基础.
文献关键词：
呋喃唑酮代谢物(AOZ);偶联;人工抗原;ELISA
中图分类号：
作者姓名：
吴萌;吴海涛;圣志存;陈晓兰;苏棪华;柳青青
作者机构：
江苏农牧科技职业学院,江苏泰州225300
文献出处：
引用格式：
[1]吴萌;吴海涛;圣志存;陈晓兰;苏棪华;柳青青-.呋喃唑酮代谢物人工抗原的制备与鉴定)[J].江苏农业科学,2022(17):192-197
A类：
B类：
呋喃唑酮代谢物,人工抗原,AOZ,重氮法,衍生物,NP,载体蛋白,牛血清白蛋白,BSA,卵清蛋白,OVA,偶联,包被,SDS,PAGE,MALDI,TOF,皮下注射,SPF,BALB,备血,抗体效价,间接竞争,免疫原性,联成,得免,BCA,试剂盒,小鼠血清,血清抗体,半数抑制浓度,IC50,完全抗原,单克隆抗体,抗体制备,快速检测方法
AB值：
0.25811
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