典型文献
副溶血弧菌外膜铁蛋白受体pvuA基因的原核表达及产物的诱导条件优化
文献摘要：
为构建弧菌铁蛋白受体pvuA重组质粒,提高其在大肠杆菌BL21中的表达产量,优化表达条件,并为其免疫原性研究奠定基础,从副溶血弧菌基因组DNA扩增了弧菌铁蛋白受体pvuA基因,构建了重组质粒pET-28a(+)-ferric vibrioferrin receptor,转入大肠杆菌BL21并经异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达蛋白.在单因素试验的基础上,以菌体初始浓度、诱导时间、诱导温度、诱导剂浓度为自变量,菌体蛋白浓度为响应值,根据响应面法的Box-Benhnken中心设计原理,研究自变量及其交互作用对弧菌铁蛋白产量的影响,利用Design-Expert和响应面分析相结合的方法对诱导条件进行优化.IPTG诱导获得的重组蛋白以包涵体的形式存在,优化后最终确定重组弧菌铁蛋白受体pvuA最佳表达条件为菌体初始浓度OD600=0.6,诱导时间10 h,诱导温度37℃,IPTG浓度为1.0 mmol·L?1,此时包涵体沉淀中蛋白含量最高,为11.00 mg·mL?1.构建了弧菌铁蛋白受体pvuA的大肠杆菌重组表达质粒,通过优化表达条件提高了纯化蛋白产率,为研究弧菌铁蛋白受体蛋白的多克隆抗体的制备和应用奠定了基础.
文献关键词：
副溶血性弧菌;外膜蛋白;响应面法;条件优化
中图分类号：
作者姓名：
刘蕾;周欣悦;朱桢;曹烨;王文彬
作者机构：
江苏省海洋生物产业技术协同创新中心,江苏 连云港 222005;江苏省海洋生物资源与环境重点实验室,江苏 连云港 222005;江苏海洋大学食品科学与工程学院,江苏 连云港 222005
文献出处：
引用格式：
[1]刘蕾;周欣悦;朱桢;曹烨;王文彬-.副溶血弧菌外膜铁蛋白受体pvuA基因的原核表达及产物的诱导条件优化)[J].生物技术进展,2022(03):396-404
A类：
pvuA,vibrioferrin
B类：
副溶血弧菌,铁蛋白,原核表达,诱导条件,条件优化,重组质粒,大肠杆菌,BL21,达产,免疫原性,pET,28a,ferric,receptor,转入,异丙基,半乳糖,糖苷,isopropyl,thiogalactoside,IPTG,诱导表达,单因素试验,初始浓度,诱导时间,诱导剂,菌体蛋白,蛋白浓度,响应值,响应面法,Box,Benhnken,设计原理,对弧,Design,Expert,响应面分析,重组蛋白,包涵体,OD600,蛋白含量,重组表达,受体蛋白,多克隆抗体,副溶血性弧菌,外膜蛋白
AB值：
0.329662
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