典型文献
蓖麻钙依赖蛋白激酶26基因克隆、表达与蛋白纯化
文献摘要:
植物蛋白激酶对蓖麻生长发育具有重要的作用,研究蓖麻蛋白激酶类钙依赖蛋白激酶26基因在大肠杆菌中的克隆、重组表达以及蛋白纯化,为进一步探索蓖麻钙依赖蛋白激酶26蛋白的功能与作用机制.通过PCR方法克隆获得蓖麻钙依赖蛋白激酶26基因表达序列,连接至原核表达载体pGEX-4T-1内后分别转化至BL21、T7、Rosetta大肠杆菌感受态中,通过不同浓度的异丙基硫代-β-D半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达,分析蓖麻钙依赖蛋白激酶26蛋白的可溶性,并利用离心法纯化获得目的蛋白.结合原核表达和蛋白纯化结果发现,转化至BL21大肠杆菌感受态中的重组蛋白在用1 mmol/L IPTG诱导下的表达量最高,纯化后可获得纯度较高的目的蛋白.
文献关键词:
蓖麻;钙依赖蛋白激酶;重组表达;蛋白纯化
中图分类号:
作者姓名:
赵慧博;赵永;温琦;梁啸天;李丽丽;黄凤兰
作者机构:
内蒙古民族大学生命科学学院,通辽028000;内蒙古自治区高校蓖麻产业工程技术中心,通辽028000;内蒙古自治区蓖麻育种重点实验室,通辽028000;内蒙古自治区蓖麻产业协同创新培育中心,通辽028000
文献出处:
引用格式:
[1]赵慧博;赵永;温琦;梁啸天;李丽丽;黄凤兰-.蓖麻钙依赖蛋白激酶26基因克隆、表达与蛋白纯化)[J].吉林农业大学学报,2022(04):401-406
A类:
B类:
蓖麻,钙依赖蛋白激酶,基因克隆,蛋白纯化,植物蛋白,麻生,蛋白激酶类,大肠杆菌,重组表达,功能与作用,原核表达载体,pGEX,4T,BL21,T7,Rosetta,感受态,异丙基,半乳糖,糖苷,isopropyl,beta,thiogalactopyranoside,IPTG,诱导表达,离心法,目的蛋白,重组蛋白
AB值:
0.313736
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