典型文献
重组布鲁菌外膜蛋白Omp19的制备方法及免疫原性研究
文献摘要：
[目的]探索重组布鲁菌Omp19蛋白的制备方法,评价其在实验动物中的免疫原性,为中试工艺放大奠定基础.[方法]利用摇瓶培养对重组Omp19蛋白进行原核诱导表达,对培养基类型、诱导剂浓度、诱导温度、诱导时间、诱导时的菌体密度等条件进行筛选;利用阳离子交换层析、疏水层析和阴离子交换层析对重组Omp19蛋白进行纯化制备;利用SDS-PAGE和分子排阻高效液相色谱法(SEC-HPLC)对重组Omp19蛋白的纯度进行鉴定;利用动物实验评价制备的重组Omp19蛋白的免疫原性.[结果]摇瓶培养试验表明,重组布鲁菌Omp19蛋白较优的表达条件为:使用LB培养基,在菌密度OD600 nm值为0.6～1.0时加入0.5 mmol/L的IPTG,于28℃诱导5 h;经3步纯化后,获得了高纯度的重组Omp19蛋白;免疫原性研究表明,经方法优化后制备的重组Omp19蛋白联合佐剂可以较好地刺激BALB/c小鼠产生特异性抗体.[结论]优化了重组布鲁菌外膜蛋白Omp19的制备方法,评价了其在小鼠中的免疫原性,为重组布鲁菌疫苗的研发提供了实验基础.
文献关键词：
布鲁菌;外膜蛋白Omp19;制备方法;蛋白纯化;免疫原性
中图分类号：
作者姓名：
辜彦霏;殷瑛;李玉杰;宰晓东;徐俊杰
作者机构：
军事科学院军事医学研究院生物工程研究所,北京 100071
文献出处：
引用格式：
[1]辜彦霏;殷瑛;李玉杰;宰晓东;徐俊杰-.重组布鲁菌外膜蛋白Omp19的制备方法及免疫原性研究)[J].畜牧与饲料科学,2022(03):1-7
A类：
Omp19
B类：
布鲁菌,外膜蛋白,制备方法,免疫原性,实验动物,中试,试工,工艺放大,摇瓶,原核,诱导表达,基类,诱导剂,诱导时间,菌体密度,阳离子交换,疏水层析,阴离子交换层析,SDS,PAGE,高效液相色谱法,SEC,HPLC,动物实验,实验评价,OD600,IPTG,高纯度,经方,方法优化,佐剂,BALB,特异性抗体,蛋白纯化
AB值：
0.256762
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