典型文献
基于NF-κB荧光蛋白报告基因抗肿瘤药物筛选平台的建立
文献摘要：
采用基因工程技术构建绿色荧光蛋白(GFP)报告基因质粒,有利于活细胞成像、蛋白质印迹(WB)、细胞流式分析及活细胞示踪等,从而对抗肿瘤药物进行筛选.利用聚合酶链反应(PCR)扩增NF-κB基因的启动子序列以及GFP基因片段,将其克隆到pGL6-Enhancer载体中,通过菌落PCR检测、酶切鉴定和测序证明了质粒构建成功.然后,将构建的质粒转染到HEK-293T细胞中,根据活细胞荧光成像、WB及流式细胞分析验证,构建的报告基因质粒在细胞内可正常表达.选择抗肿瘤药物雷帕霉素、紫杉醇、吉西他滨,以及本实验室正在研究开发的多肽类抗肿瘤药物M1-20、M1-21验证报告基因体系试验,发现构建的报告基因质粒可以响应药物对细胞的影响.该药物筛选平台的建立为研究抗肿瘤药物对供试细胞的影响提供了良好的试验技术体系,同时,也为构建活细胞示踪体系提供了材料.
文献关键词：
报告基因;启动子;分子克隆;抗肿瘤药物;药物筛选平台
中图分类号：
作者姓名：
王瑞萍;程浩杰;余雳;黄明敏;谭拥军
作者机构：
湖南大学生物学院,长沙 410082
文献出处：
引用格式：
[1]王瑞萍;程浩杰;余雳;黄明敏;谭拥军-.基于NF-κB荧光蛋白报告基因抗肿瘤药物筛选平台的建立)[J].激光生物学报,2022(06):506-511
A类：
pGL6
B类：
报告基因,抗肿瘤药物,药物筛选平台,基因工程技术,技术构建,绿色荧光蛋白,GFP,活细胞成像,蛋白质印迹,WB,流式分析,细胞示踪,聚合酶链反应,启动子序列,Enhancer,菌落,质粒构建,质粒转染,HEK,293T,荧光成像,流式细胞分析,分析验证,雷帕霉素,紫杉醇,吉西他滨,研究开发,多肽,肽类,M1,该药,立为,试验技术,分子克隆
AB值：
0.3064
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