目的:探讨miR-431-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能的分子机制.方法:取经病理诊断确诊为胃癌的68例患者的胃癌组织及其癌旁组织.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测胃癌组织、癌旁组织和人正常胃黏膜上皮GES-1细胞、人胃癌细胞(MKN-28、MGC-803、MKN-45、SGC-7901和HGC-27)中miR-431-3p及羧基末端结构域磷酸酶1(CTDP1)mRNA表达水平,Western blotting法检测上述细胞中CTDP1蛋白和各组SGC-7901细胞中细胞色素C(Cyt C)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平.采用Pearson相关分析法分析miR-431-3p与CTDP1 mRNA表达水平的相关性,双荧光素酶报告基因实验检测miR-431-3p和CTDP1的靶向关系.将miR-431-3p mimic和CTDP1过表达慢病毒分别或同时转染至SGC-7901细胞中,将细胞分为空白组、空载过表达(mimic NC)组、miR-431-3p过表达(miR-431-3p mimic)组、空载慢病毒(Vector)组、CTDP1过表达慢病毒(CTDP1过表达)组和miR-431-3p mimic+CTDP1过表达(共转染)组.MTT法检测各组SGC-7901细胞增殖活性,克隆形成实验检测各组SGC-7901细胞单克隆形成数,流式细胞术检测各组SGC-7901细胞凋亡率.结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中miR-431-3p表达水平降低(P<0.01),CTDP1 mRNA表达水平升高(P<0.01),并且二者表达水平呈负相关关系(r=-0.316,P=0.009).与GES-1细胞比较,其他5种胃癌细胞中miR-431-3p表达水平均降低(P<0.01),CTDP1 mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05).双荧光素酶报告系统,miR-431-3p靶向调控CTDP1表达.与空白组和mimic NC组比较,miR-431-3p组SGC-7901细胞中CTDP1和Bcl-2蛋白表达水平、细胞增殖活性和克隆形成数降低(P<0.05),细胞凋亡率和细胞中Cyt C及Bax蛋白表达水平升高(P<0.05).与空白组和Vector组比较,CTDP1过表达组SGC-7901细胞中CTDP1和Bcl-2蛋白表达水平、细胞增殖活性及克隆形成数升高(P<0.05);细胞凋亡率和细胞中Cyt C及Bax蛋白表达水平降低(P<0.05).与空白组和miR-431-3p组比较,共转染组SGC-7901细胞中CTDP1和Bcl-2蛋白表达水平、细胞增殖活性及克隆形成数水平升高(P<0.05),细胞凋亡率和细胞中Cyt C及Bax蛋白表达水平降低(P<0.05).结论:miR-431-3p过表达能抑制人胃癌细胞增殖,并促进细胞凋亡,可能是与靶向下调CTDP1基因表达有关.

胃肿瘤;miR-431-3p;羧基末端结构域磷酸酶1;细胞增殖;细胞凋亡

谢先顺;王伟;蒋海兵

南华大学衡阳医学院附属第二医院血液肿瘤内科,湖南 衡阳 421001;南华大学衡阳医学院附属第二医院消化内科,湖南 衡阳 421001

吉林大学学报（医学版）

[1]谢先顺;王伟;蒋海兵-.miR-431-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其靶向调控CTDP1基因表达机制)[J].吉林大学学报（医学版）,2022(06):1555-1565

CTDP1,mimic+CTDP1

miR,3p,胃癌细胞,增殖和凋亡,靶向调控,表达机制,取经,病理诊断,胃癌组织,癌旁组织,qPCR,胃黏膜,黏膜上皮,GES,MKN,MGC,SGC,HGC,羧基,结构域,blotting,细胞色素,Cyt,细胞淋巴瘤,Bcl,Bax,蛋白表达水平,相关分析法,双荧光素酶报告基因实验,实验检测,过表达,慢病毒,空载,NC,Vector,共转染,MTT,细胞增殖活性,克隆形成,单克隆,流式细胞术,细胞凋亡率,平降,双荧光素酶报告系统,胃肿瘤

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