典型文献
miR-107对卵巢癌细胞免疫逃逸的调控和紫杉醇耐药性的影响
文献摘要:
目的:探讨微小RNA-107(miR-107)通过丝裂原活化蛋白3激酶7(MAP3K7)调控卵巢癌细胞免疫逃逸对紫杉醇(TAX)耐药性的影响,并阐明其作用机制.方法:293T细胞分为miRNC组(转染miR-NC)和miR-107 mimics组(转染miR-107 mimics).采用浓度梯度递增法处理卵巢癌SKOV3细胞,获得TAX耐药细胞SKOV3/TAX.SKOV3/TAX细胞随机分为空白对照组、TAX(给予4.0μmol·L-1 TAX)组、TAX+miR-107 mimics(给予4.0μmol·L-1 TAX且转染miR-107mimics)组和TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7(给予4.0μmol·L-1 TAX且转染miR-107mimics和pcDNA-MAP3K7)组;分别与人外周血淋巴细胞HPBL共培养,分为HPBL组、HPBL+SKOV3/TAX组、HPBL+SKOV3/TAX+TAX组、HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics组和HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测细胞中miR-107表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-107和MAP3K7的靶向关系,Western blotting法检测各组细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平,CCK-8法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率.结果:与人卵巢上皮细胞HOSEpic比较,卵巢癌细胞中miR-107表达水平降低(P<0.05).MAP3K7的3′-UTR与miR-107存在靶向结合位点.双荧光素酶报告基因实验,与miR-NC组比较,过表达miR-107组野生型MAP3K7的荧光素酶活性降低(P<0.01).Western blotting法检测,过表达miR-107组细胞中MAP3K7蛋白表达水平低于miR-NC组(P<0.01).RT-qPCR检测,与空白对照组比较,TAX组SKOV3/TAX细胞中miR-107 mRNA表达水平升高(P<0.01);与TAX组比较,TAX+miR-107 mimics组SKOV3/TAX细胞中miR-107mRNA表达水平升高(P<0.05).与空白对照组比较,TAX组SKOV3/TAX细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平降低(P<0.01);与TAX组比较,TAX+miR-107 mimics组SKOV3/TAX细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01);与TAX+miR-107 mimics组比较,TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7组SKOV3/TAX细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01).与HPBL+SKOV3/TAX组比较,HPBL+SKOV3/TAX+TAX组HPBL细胞中FAS蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05);与HPBL+SKOV3/TAX+TAX组比较,HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics组HPBL细胞中FAS蛋白表达水平和细胞凋亡率降低(P<0.05);与HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics组比较,HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7组HPBL细胞中FAS蛋白表达水平降低(P<0.01),且细胞凋亡率降低(P<0.01).与空白对照组比较,TAX组SKOV3/TAX细胞存活率降低(P<0.05);与TAX组比较,TAX+miR-107 mimics组SKOV3/TAX细胞存活率降低(P<0.05).与TAX+miR-107 mimics组比较,TAX+miR-107mimics+pcDNA-MAP3K7组SKOV3/TAX细胞存活率明显升高(P<0.05).与空白对照组比较,TAX组SKOV3/TAX细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与TAX组比较,TAX+miR-107组SKOV3/TAX细胞凋亡率升高(P<0.05);与TAX+miR-107 mimics组比较,TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7组细胞凋亡率降低(P<0.05).结论:miR-107在SKOV3/TAX细胞中呈低表达,且miR-107通过抑制MAP3K7的表达,抑制SKOV3/TAX细胞免疫逃逸,缓解卵巢癌细胞TAX耐药性.
文献关键词:
卵巢肿瘤;微小RNA-107;免疫逃逸;紫杉醇;耐药
中图分类号:
作者姓名:
王青慧;李波;胡传翠;聂明朝;郑小妹
作者机构:
海南省妇女儿童医学中心妇产科,海南海口570206;海南医学院第一附属医院妇产科,海南海口570102
文献出处:
引用格式:
[1]王青慧;李波;胡传翠;聂明朝;郑小妹-.miR-107对卵巢癌细胞免疫逃逸的调控和紫杉醇耐药性的影响)[J].吉林大学学报(医学版),2022(03):734-743
A类:
miRNC,TAX+miR,107mimics,HPBL,HPBL+SKOV3,TAX+TAX,TAX+TAX+miR,HOSEpic,107mRNA,107mimics+pcDNA
B类:
卵巢癌细胞,细胞免疫,免疫逃逸,紫杉醇耐药,耐药性,丝裂原,MAP3K7,293T,转染,浓度梯度,空白对照,人外周血淋巴细胞,共培养,qPCR,双荧光素酶报告基因实验,blotting,FAS,蛋白表达水平,CCK,细胞存活率,流式细胞术,细胞凋亡率,卵巢上皮细胞,平降,UTR,结合位点,过表达,野生型,荧光素酶活性,低表达,卵巢肿瘤
AB值:
0.069633
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