典型文献
lncRNA-NORAD表达对食管癌Eca-109细胞生物学行为的影响及其机制
文献摘要：
目的:研究长链非编码RNA(lncRNA)-DNA损伤诱导的非编码RNA(NORAD)在食管癌Eca-109细胞中的表达,分析沉默NORAD通过miR-26a-5p/Unc-51样自噬激活激酶1(ULK1)对食管癌Eca-109细胞生物学行为的影响.方法:收集45例食管癌患者癌组织和40例癌旁正常组织标本,培养正常人食管鳞状上皮Het-1A细胞和食管癌Eca-109细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测癌组织、癌旁正常组织、Het-1A细胞和Eca-109细胞中NORAD mRNA、miR-26a-5p和ULK1 mRNA表达水平.采用miRanda数据库检测NORAD与miR-26a-5p的结合位点,双荧光素酶报告基因实验检测NORAD与miR-26a-5p的关系.根据实验目的和转染质粒的不同,Eca-109细胞分为siRNA NC组和NORAD siRNA组,inhibitor NC组和miR-26a-5p inhibitor组,pcDNA-3.1(+)+mimics NC组、pcDNA-NORAD+mimics NC组、pcDNA-3.1(+)+miR-26a-5p mimics组和pcDNA-NORAD+miR-26a-5p mimics组,采用MTT法检测各组细胞活性,Transwell法检测各组细胞中侵袭细胞数,Western blotting法检测各组细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达水平.采用TargetScan数据库检测miR-26a-5p与ULK1的结合位点,双荧光素酶报告基因实验检测miR-26a-5p与ULK1的关系.Eca-109细胞分为siRNA NC组和ULK1 siRNA组,采用MTT法检测各组细胞活性,Transwell法检测各组细胞中侵袭细胞数,Western blotting法检测各组细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达水平.Eca-109细胞分为siRNA NC+inhibitor NC组、NORAD siRNA+inhibitor NC组、siRNA NC+miR-26a-5p inhibitor组和NORAD siRNA+miR-26a-5p inhibitor组,采用RT-qPCR和Western blotting法检测各组细胞中ULK1 mRNA和蛋白表达水平.结果:与癌旁组织或Het-1A细胞比较,食管癌组织或Eca-109细胞中NORAD和ULK1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01),miR-26a-5p表达水平明显降低(P<0.01).与siRNA NC组比较,NORAD siRNA组细胞活性明显降低(P<0.01),侵袭细胞数明显减少(P<0.01),细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),N-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.01).miRcode数据库和双荧光素酶报告基因检测,NORAD靶向miR-26a-5p.与inhibitor NC组比较,miR-26a-5p inhibitor组细胞活性明显升高(P<0.01),侵袭细胞数明显增加(P<0.01),细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.01),N-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01).与pcDNA-3.1(+)+miR-26a-5p mimics组比较,pcDNA-NORAD+miR-26a-5p mimics组细胞活性明显升高(P<0.01),侵袭细胞数明显增加(P<0.01),细胞中E-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.01),N-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01).TargetScan数据库和双荧光素酶报告基因检测,miR-26a-5p靶向ULK1.与siRNA NC组比较,ULK1 siRNA组细胞活性明显降低(P<0.01),侵袭细胞数明显减少(P<0.01),细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),N-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.01).与siRNA NC+miR-26a-5p inhibitor组比较,NORAD siRNA+miR-26a-5p inhibitor组细胞中ULK1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01).结论:沉默lncRNA-NORAD可抑制Eca-109细胞增殖、侵袭和上皮-间质转化(EMT),其机制可能是通过调控miR-26a-5p/ULK1轴实现的.
文献关键词：
长链非编码RNA;DNA损伤诱导的非编码RNA;miR-26a-5p;Unc-51样自噬激活激酶1;食管肿瘤;细胞增殖
中图分类号：
作者姓名：
周超锋;周世繁;田青;王赛;李洪霖;马纯政
作者机构：
河南省中医院 河南中医药大学第二附属医院肿瘤科,河南 郑州 450002
文献出处：
引用格式：
[1]周超锋;周世繁;田青;王赛;李洪霖;马纯政-.lncRNA-NORAD表达对食管癌Eca-109细胞生物学行为的影响及其机制)[J].吉林大学学报（医学版）,2022(01):33-43
A类：
NORAD+mimics,NORAD+miR,NC+inhibitor,siRNA+inhibitor
B类：
lncRNA,Eca,细胞生物学行为,长链非编码,26a,5p,Unc,自噬,ULK1,食管癌患者,正常组织,组织标本,养正,正常人,鳞状上皮,Het,1A,qPCR,miRanda,数据库检测,结合位点,双荧光素酶报告基因实验,实验检测,实验目的,转染,质粒,pcDNA,MTT,细胞活性,Transwell,blotting,钙黏蛋白,cadherin,蛋白表达水平,TargetScan,NC+miR,siRNA+miR,癌旁组织,食管癌组织,miRcode,基因检测,平降,可抑制,间质转化,EMT,食管肿瘤
AB值：
0.123137
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