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急性淋巴细胞白血病移植瘤模型小鼠髓外浸润过程中血清Wnt5A和LINE-1启动子甲基化水平检测及其意义
文献摘要：
目的:建立绿色荧光蛋白(GFP)标记的急性淋巴细胞白血病(ALL)移植瘤小鼠模型,研究ALL髓外浸润过程中血清游离DNA(cfDNA)特异基因甲基化的变化,为ALL髓外浸润监测提供理论和实验依据.方法:60只ICR小鼠随机分为对照组、实验15 d组和实验30 d组,每组20只.实验组小鼠通过尾静脉注射构建GFP标记ALL移植小鼠模型,流式细胞术检测白血病细胞髓外浸润情况.分别在建模后第15和30天时采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组小鼠血清中双加氧酶2(TET2)、DNA甲基转移酶3α(DNMT3a)、DNA甲基转移酶3β(DNMT3b)、Wnt家族成员5A(Wnt5A)及逆转座子长散布核元件-1(LINE-1)mRNA表达水平,重亚硫酸盐测序法(BSP)检测各组血清中Wnt5A和LINE-1启动子区甲基化水平.结果:实验15 d组和实验30 d组小鼠脾脏组织中均可见明显绿色荧光,且实验30 d组较实验15 d组荧光强度增强;实验30 d组小鼠脾脏质量高于对照组(P<0.05),脾肿大较为明显.流式细胞术检测,与对照组比较,实验15 d组和实验30 d组小鼠外周血细胞荧光强度均明显增强,且实验30 d组小鼠外周细胞血荧光强度较实验15 d组增强(P<0.05).RT-qPCR法检测,与对照组比较,实验15 d组和实验30 d组小鼠血清中Wnt5A和TET2 mRNA表达水平均明显降低(P<0.05),LINE-1、DNMT3a和DNMT3b mRNA表达水平明显升高(P<0.05).BSP法检测,与对照组比较,实验15 d组和实验30 d组小鼠血清LINE-1启动子区甲基化水平明显降低(P<0.05),在浸润过程中逐步呈现低甲基化;抑癌基因Wnt5A启动子区甲基化水平明显升高(P<0.05).结论:ALL移植瘤小鼠模型于建模早期即出现髓外浸润,血清cfDNA中Wnt5A和LINE-1启动子区的异常甲基化直接影响其异常表达.cfDNA特异位点甲基化水平检测可为ALL早期诊断与治疗监测提供新的方法和策略.
文献关键词：
急性淋巴细胞白血病;髓外浸润;循环游离DNA;甲基化;表观遗传
中图分类号：
作者姓名：
王一涵;王奕丹;惠赫童;范馨元;王添琦;夏薇;刘丽梅
作者机构：
北华大学医学技术学院实验中心,吉林 吉林132013
文献出处：
引用格式：
[1]王一涵;王奕丹;惠赫童;范馨元;王添琦;夏薇;刘丽梅-.急性淋巴细胞白血病移植瘤模型小鼠髓外浸润过程中血清Wnt5A和LINE-1启动子甲基化水平检测及其意义)[J].吉林大学学报（医学版）,2022(02):284-290
A类：
B类：
急性淋巴细胞白血病,移植瘤模型,模型小鼠,髓外浸润,Wnt5A,LINE,启动子甲基化,甲基化水平,水平检测,绿色荧光蛋白,GFP,ALL,小鼠模型,cfDNA,异基因,基因甲基化,ICR,尾静脉注射,流式细胞术,天时,qPCR,小鼠血清,加氧酶,TET2,甲基转移酶,DNMT3a,DNMT3b,转座子,子长,散布,重亚硫酸盐测序,BSP,启动子区甲基化,脾脏,荧光强度,脾肿大,外周血细胞,明显增强,周细胞,抑癌基因,异常表达,异位,诊断与治疗,治疗监测,方法和策略,环游,表观遗传
AB值：
0.21441
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