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抗小鼠干扰素调节因子7多克隆抗体的制备及鉴定
文献摘要：
目的 获得小鼠干扰素调节因子7(IRF7)抗原,制备抗小鼠IRF7多克隆抗体并鉴定.方法 构建原核表达质粒pET?28a(+)?IRF7,在大肠杆菌中表达IRF7,用Ni柱纯化获得抗原后,分别采用MnJ胶体锰佐剂和弗氏佐剂制备免疫原,3次免疫后心脏取血分离血清,采用间接ELISA法测定血清效价、纯化试剂盒纯化抗体、Western印迹和免疫沉淀对抗体生物学活性进行鉴定.结果 在大肠杆菌中成功表达IRF7并获得纯蛋白.两种佐剂制备的多抗血清,效价均可达到810×103倍.血清纯化后获得抗IRF7抗体,经Western印迹鉴定,两个多克隆抗体均能够特异识别真核表达的IRF7蛋白,并在免疫沉淀外源表达IRF7时,其效果明显优于商业化抗体.结论 成功制备了抗IRF7多克隆抗体,为后续研究IRF7功能及作用机制奠定了基础.
文献关键词：
干扰素调节因子7;表达;纯化;多克隆抗体;鉴定
中图分类号：
作者姓名：
杨锡琴;邹滔;张耀林;张纪岩
作者机构：
军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所,北京 100850
文献出处：
引用格式：
[1]杨锡琴;邹滔;张耀林;张纪岩-.抗小鼠干扰素调节因子7多克隆抗体的制备及鉴定)[J].军事医学,2022(09):673-676,681
A类：
MnJ
B类：
干扰素调节因子,多克隆抗体,IRF7,原核表达,质粒,pET,28a,大肠杆菌,胶体,弗氏佐剂,免疫原,后心,血分,效价,试剂盒,免疫沉淀,生物学活性,多抗,抗血清,清纯,真核表达,外源表达
AB值：
0.225948
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