典型文献
基于gL蛋白的牛传染性鼻气管炎间接ELISA检测方法的建立及初步应用
文献摘要:
为建立牛传染性鼻气管炎(infectious bovine rhintracheitis,IBR)的血清学诊断方法,本试验对牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhintracheitis virus,IBRV)gL蛋白进行原核表达和纯化,作为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法.结果显示,iELISA方法的最优反应条件:抗原包被质量浓度为0.773 mg/L,4℃过夜;3%BSA、37℃封闭1 h;血清1 ∶20稀释,室温孵育30 min;二抗稀释度为1 ∶5 000,37℃孵育30 min;底物反应条件为37℃5 min.特异性试验结果显示,该方法仅与IBR阳性血清反应呈阳性,而与牛口蹄疫(FMD)、牛病毒性腹泻(BVD)、布鲁菌病的阳性血清无交叉反应.敏感性试验结果显示,阳性血清1∶640稀释时检测结果仍呈阳性,表明该方法敏感性较高.重复性试验结果显示,批内变异系数为1.9%~7.7%,批间变异系数为2.6%~4.6%.对171份牛血清进行IBRV抗体检测,本试验建立的iELISA方法检出阳性样品67份,阳性率为39%;商品化试剂盒检出阳性样品60份,阳性率为35%,二者的阴性符合率为89.6%,阳性符合率为93.6%.本试验建立的iELISA方法可用于IBR的临床检测,为IBR的检疫防控提供技术支持.
文献关键词:
牛传染性鼻气管炎;gL蛋白;间接ELISA
中图分类号:
作者姓名:
张鹿;付祥;柳翠翠;陈钰彬;郭珂宇;赵桂新;张志强;史秋梅;吴同垒
作者机构:
河北科技师范学院河北省预防兽医学重点试验室,河北秦皇岛066004
文献出处:
引用格式:
[1]张鹿;付祥;柳翠翠;陈钰彬;郭珂宇;赵桂新;张志强;史秋梅;吴同垒-.基于gL蛋白的牛传染性鼻气管炎间接ELISA检测方法的建立及初步应用)[J].中国兽医学报,2022(12):2363-2367
A类:
rhintracheitis
B类:
gL,初步应用,infectious,bovine,血清学诊断,牛传染性鼻气管炎病毒,virus,IBRV,原核表达,包被抗原,iELISA,反应条件,过夜,BSA,孵育,抗稀释,底物,阳性血清,牛口蹄疫,FMD,牛病毒性腹泻,BVD,布鲁菌病,交叉反应,敏感性试验,重复性试验,抗体检测,商品化,试剂盒,符合率,临床检测,检疫
AB值:
0.284139
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