典型文献
核苷磷酸化酶的工程菌构建
文献摘要:
使用PCR扩增技术对来源于AEM0812菌株的核苷磷酸化酶基因进行扩增.利用克隆载体pD18-T进行连接,构建重组质粒pMD18-T-deoD,再将其导入Escherichia coli DH5α菌体内,克隆目的基因.利用表达载体pET-28a与目的基因构建重组质粒pET-28a-deoD,导入E.coli BL21(DE3)菌体内,获得工程菌E.coli(deoD).利用IPTG进行诱导表达,采用SDS-PAGE方法检测到在大约27 KD处出现了明显的蛋白条带,其分子量与已知的嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)的分子量(25.82 KD)一致,这表明在E.coli(deoD)中成功表达出deoD基因,同时表明成功构建了嘌吟核苷磷酸化酶(PNPase)工程菌.
文献关键词:
嘌吟核苷磷酸化酶(PNPase)表达;工程菌;基因克隆与表达
中图分类号:
作者姓名:
段佩玲;王振宇;刘国生
作者机构:
郑州铁路职业技术学院,河南郑州 451460;河南师范大学生命科学学院,河南新乡 453007
文献出处:
引用格式:
[1]段佩玲;王振宇;刘国生-.核苷磷酸化酶的工程菌构建)[J].郑州铁路职业技术学院学报,2022(04):60-62,67
A类:
AEM0812,pD18,deoD,PNPase
B类:
磷酸化酶,工程菌构建,酶基因,克隆载体,重组质粒,pMD18,Escherichia,coli,DH5,菌体,目的基因,表达载体,pET,28a,BL21,DE3,IPTG,诱导表达,SDS,PAGE,KD,白条,条带,分子量,嘌呤,嘌吟,基因克隆与表达
AB值:
0.302686
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