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重叠基因在异源蛋白表达中的新应用
文献摘要:
大肠杆菌在调控异源蛋白的表达量和可溶性方面仍然存在困难.研究开发一种融合重叠基因结构和mRNA 5′-端序列优化的蛋白表达调控方法.在表达基因起始密码子前引入两个碱基TG,利用pET-28a质粒载体表达框的5′-端标签,与其形成TGATG的重叠基因类型的表达结构.再通过设计简并引物对异源基因mRNA的5′-端连续14个密码子区域进行同义密码子突变,改变mRNA的二级结构,实现重叠基因结构强度筛选.利用这种方法,在不改变质粒组成和外界条件的情况下就能影响异源蛋白的表达量,并通过影响翻译过程速率来调控蛋白可溶性.通过对多个异源基因表达优化实例,证明重叠基因结构在调控蛋白可溶性表达中的作用.为大肠杆菌中异源蛋白在表达量和可溶性问题的优化方面提供一种简单的调控策略.
文献关键词:
大肠杆菌;异源表达;同义密码子;mRNA结构;重叠基因
中图分类号:
作者姓名:
彭凯;逯晓云;卢丽娜;张娟琨;江会锋
作者机构:
天津科技大学 生物工程学院,天津 300457;中国科学院天津工业生物技术研究所系统微生物工程重点实验室,天津 300308
文献出处:
引用格式:
[1]彭凯;逯晓云;卢丽娜;张娟琨;江会锋-.重叠基因在异源蛋白表达中的新应用)[J].生物学杂志,2022(06):101-107
A类:
TGATG
B类:
重叠基因,异源蛋白表达,大肠杆菌,存在困难,研究开发,基因结构,序列优化,表达调控,调控方法,表达基因,碱基,pET,28a,质粒,基因类型,简并引物,子区域,行同,同义密码子,二级结构,结构强度,变质,粒组,外界条件,翻译过程,调控蛋白,表达优化,可溶性表达,调控策略,异源表达
AB值:
0.298822
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