典型文献
侵染西番莲的三种马铃薯Y病毒属病毒的广谱单克隆抗体制备及检测应用
文献摘要:
马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus,TelMV)、东亚西番莲病毒(East Asian passiflora virus,EAPV)和西番莲重型斑驳相关病毒(Passion fruit severe mottle-associated virus,PFSMaV)严重危害我国西番莲(Passiflora edulis)产业.迄今植物病毒没有有效的防治药剂,而病毒检测技术是植物病毒防控手段建立的关键.本研究利用田间采集的TelMV、EAPV和PFSMaV三种病毒复合侵染的西番莲,从病叶提纯病毒粒子,以混合病毒粒子作为BALB/c小鼠(Mus musculus)的免疫原,通过杂交瘤技术获得能特异、广谱检测这3种病毒的单克隆抗体.Western blot检测发现,研制的4株单克隆抗体能同时识别TelMV、EAPV和PFSMaV的衣壳蛋白.进一步以制备的病毒单抗为检测抗体,建立用于快速检测这3种病毒的血清学检测方法,即斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)和组织印迹酶联免疫吸附试验(Tissue print-ELISA).特异性和广谱性测定结果表明,建立的2种血清学方法均能简单快速、特异灵敏、广谱高效地检测西番莲中的TelMV、EAPV和PFSMaV,而检测感染同属的李痘病毒(Plumpox virus,PPV)、马铃薯Y病毒(Potato Virus Y,PVY)、马铃薯A病毒(Potato Virus A,PVA)和芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)病叶、感染黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和西番莲潜隐病毒(Passiflora latent virus,PLV)的病叶及健康西番莲叶片均呈阴性反应.灵敏度测定结果表明,Dot-ELISA方法检测病叶粗提液的灵敏度高达1:20480(W/V,g/mL)倍稀释,即绝对检出量为0.0976 ng感病植物组织.田间样品的检测结果表明,建立的2种血清学方法能准确、广谱、灵敏地用于检测侵染西番莲的3种马铃薯Y病毒属病毒,其结果与RT-PCR的符合率达到100%.本研究为TelMV、EAPV和PFSMaV三种病毒的检测诊断、无毒种子种苗生产及其科学防控提供技术支持.
文献关键词:
马铃薯Y病毒属;夜来香花叶病毒(TelMV);东亚西番莲病毒(EAPV);西番莲重型斑驳相关病毒(PFSMaV);单克隆抗体;斑点ELISA (Dot-ELISA);组织印迹ELISA (Tissue print-ELISA)
中图分类号:
作者姓名:
李雪;李晋海;王兰花;戚朵;郭萌萌;周雪平;吴建祥
作者机构:
浙江大学生物技术研究所/水稻生物学国家重点实验室,杭州310058;丘北县农业绿色发展服务中心,丘北663200
文献出处:
引用格式:
[1]李雪;李晋海;王兰花;戚朵;郭萌萌;周雪平;吴建祥-.侵染西番莲的三种马铃薯Y病毒属病毒的广谱单克隆抗体制备及检测应用)[J].农业生物技术学报,2022(09):1845-1854
A类:
TelMV,passiflora,PFSMaV,Plumpox,Turnip
B类:
种马,马铃薯,单克隆抗体,抗体制备,检测应用,Potyvirus,夜来香花叶病毒,Telosma,mosaic,东亚西番莲病毒,East,Asian,EAPV,斑驳,Passion,fruit,severe,mottle,associated,严重危害,Passiflora,edulis,植物病毒,防治药剂,病毒检测,病毒防控,防控手段,研究利用,田间,复合侵染,提纯,合病,BALB,Mus,musculus,免疫原,杂交瘤技术,技术获得,blot,衣壳蛋白,单抗,检测抗体,快速检测,血清学检测,斑点,酶联免疫吸附试验,Dot,Tissue,print,广谱性,测定结果,血清学方法,同属,痘病毒,PPV,Potato,Virus,PVY,PVA,芜菁,TuMV,黄瓜花叶病毒,Cucumber,CMV,潜隐,latent,PLV,莲叶,阴性反应,提液,灵敏度高,植物组织,符合率,检测诊断,无毒,毒种,种子种苗,科学防控
AB值:
0.308274
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