典型文献
大豆单锌指蛋白基因GmSZFP的克隆及其在SMV与寄主互作中的功能
文献摘要：
[目的]由大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)引起的大豆花叶病是世界性大豆病害之一,利用病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)技术研究GmSZFP在大豆与SMV互作过程中发挥的功能,为深入探讨其分子机制奠定基础.[方法]以大豆品种冀豆7号与SMV毒株SC-8、N3组成的亲和、不亲和组合为试验材料,运用生物信息学预测GmSZFP的分子结构特征;以酵母转录激活试验检测其转录因子活性;借助实时定量PCR(RT-qPCR)验证GmSZFP在大豆与SMV互作中转录水平的表达特征;结合VIGS技术探究GmSZFP在大豆与SMV互作过程中的功能.[结果]通过PCR克隆GmSZFP的CDS区,序列全长为1 071 bp;氨基酸序列分析和酵母转录激活试验发现GmSZFP为C2H2型锌指蛋白转录因子,且具有转录激活活性;RT-qPCR结果显示,GmSZFP受SMV的强烈诱导,在亲和组合与不亲和组合中的表达模式不同,在不亲和组合中,GmSZFP呈先上升后下降的表达趋势,其表达水平明显高于亲和组合,若在接种病毒前给叶片预注射咪唑,GmSZFP的表达水平降低,并与亲和组合相近,说明GmSZFP在转录水平响应SMV的侵染并受胞内H202信号调控;利用VIGS技术沉默GmSZFP后,发现接种部位胼胝质的积累水平较对照大大降低,RT-qPCR检测胼胝质合酶基因GmGSL7c和GmGSL12b的表达量较对照降低,胼胝质水解酶基因BG的表达量较对照增加;在基因沉默植株叶片上点接种SMV后72 h,病毒向外扩散至2 mm,在96 h时病毒扩散至3 mm,而对照组叶片在接种点外始终未能检测到SMV外壳蛋白CP的表达;摩擦接种SMV后10 d,在基因沉默植株的上位叶表现出花叶、失绿和卷曲等感病症状,并检测到CP的表达,说明沉默GmSZFP后,SMV在胞间扩散和长距离运输的能力均增强.[结论]大豆GmSZFP是典型的C2H2型单锌指蛋白,GmSZFP在大豆抵抗SMV侵染过程中发挥正调控作用.
文献关键词：
大豆花叶病毒;单锌指蛋白;病毒诱导的基因沉默技术(VIGS);功能分析
中图分类号：
作者姓名：
赵玎玲;王梦璇;孙天杰;苏伟华;赵志华;肖付明;赵青松;闫龙;张洁;王冬梅
作者机构：
河北农业大学生命科学学院/华北作物改良与调控国家重点实验室/河北省植物生理与分子病理学重点实验室,河北保定071001;河北省邯郸市农业科学院,河北邯郸056001;河北省农林科学院粮油作物研究所,石家庄050035
文献出处：
引用格式：
[1]赵玎玲;王梦璇;孙天杰;苏伟华;赵志华;肖付明;赵青松;闫龙;张洁;王冬梅-.大豆单锌指蛋白基因GmSZFP的克隆及其在SMV与寄主互作中的功能)[J].中国农业科学,2022(14):2685-2695
A类：
GmSZFP,GmGSL7c,GmGSL12b
B类：
单锌指蛋白,SMV,寄主,大豆花叶病毒,soybean,mosaic,virus,世界性,病毒诱导的基因沉默,induced,gene,silencing,VIGS,互作过程,大豆品种,毒株,SC,N3,分子结构,酵母,试验检测,实时定量,qPCR,转录水平,表达特征,技术探究,CDS,全长,bp,氨基酸序列,序列分析,C2H2,转录激活活性,表达模式,先上,预注射,咪唑,平降,H202,信号调控,胼胝质,大大降低,酶基因,水解酶,BG,植株,上点,外扩散,时病,外壳蛋白,CP,上位,失绿,卷曲,病症状,长距离运输,侵染过程,正调控,功能分析
AB值：
0.253059
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