典型文献
C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位对PCV2 VLPs稳定性的影响
文献摘要：
[目的]利用大肠杆菌原核表达系统表达猪圆环病毒2型Cap蛋白及在其C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位的Cap嵌合蛋白,对Cap蛋白形成的病毒样颗粒(VLPs)的稳定性、免疫原性以及C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位VLPs的热稳定性进行研究,为猪圆环病毒2型(PCV2)VLPs疫苗的高效制备及基于Cap VLPs纳米骨架展示技术嵌合疫苗的开发奠定基础.[方法]采用分子生物学方法合成PCV2b型强毒株ZJ的cap基因,在其C-端插入PRRSV T细胞抗原表位T1、T2、T3、T4、T5,构建cap-T1～cap-T5基因;将cap及cap-T1～cap-T5基因与pET28a表达载体连接,构建重组表达载体,转染大肠杆菌ClearColiTMBL21(DE3)进行诱导表达,并对表达产物的热稳定性及免疫效果进行检测.[结果]实现了Cap蛋白及其C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位的Cap-T1、Cap-T2、Cap-T3、Cap-T4和Cap-T5嵌合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达,并成功观察到了 VLPs;表达产物热稳定性分析显示,在60℃处理30 min条件下,Cap VLPs保持稳定,而C～端嵌合PRRSV T细胞抗原表位的VLPs热稳定性大幅下降;小鼠免疫效果检测显示,Cap VLPs诱导产生了高水平特异性抗体,其中VLPs+佐剂S350组效果最好.[结论]利用大肠杆菌表达系统表达的PCV2 Cap蛋白可高效自组装成耐热和高免疫原性的VLPs,但在Cap蛋白C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位后的嵌合VLPs组装效果和稳定性急剧下降,提示PCV2 VLPs作为纳米骨架用于传染病疫苗研发仍有较大局限性.
文献关键词：
猪圆环病毒;Cap蛋白;C-端嵌合;病毒样颗粒;热稳定性;免疫原性
中图分类号：
作者姓名：
刘项羽;聂庆庆;杜恩岐
作者机构：
西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100
文献出处：
引用格式：
[1]刘项羽;聂庆庆;杜恩岐-.C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位对PCV2 VLPs稳定性的影响)[J].西北农林科技大学学报（自然科学版）,2022(11):9-16
A类：
ClearColiTMBL21,VLPs+
B类：
嵌合,PRRSV,抗原表位,原核表达,表达系统,猪圆环病毒,Cap,白及,病毒样颗粒,免疫原性,高效制备,分子生物学方法,PCV2b,毒株,ZJ,cap,T4,T5,pET28a,表达载体,重组表达,转染,DE3,诱导表达,达产,免疫效果,可溶性表达,热稳定性分析,效果检测,特异性抗体,佐剂,S350,大肠杆菌表达,自组装,装成,耐热,性急,急剧下降,病疫苗,疫苗研发
AB值：
0.209017
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