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典型文献
lncRNA-PCAT6通过调控miR-185/SIX1轴对肺癌A549细胞上皮间质转化及化疗敏感性的影响
文献摘要:
目的:探讨长链非编码RNA-PCAT6(lncRNA-PCAT6)对肺癌A549细胞上皮间质转化(EMT)和化疗敏感性的影响,以及对微小RNA-185(miR-185)/SIX1轴的调控作用.方法:取A549细胞,分为空白组、lncRNA-PCAT6低表达腺病毒(PCAT6-Si)组、不含lncRNA-PCAT6-Si的空病毒载体(eGFP-Si-1)组、miR-185低表达腺病毒(miR-185-Si)组、不含miR-185-Si的空病毒载体(eGFP-Si-2)组、PCAT6-Si与miR-185-Si共转染(PCAT6-Si+miR-185-Si)组.RT-qPCR法检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达;Transwell法测定细胞侵袭、迁移能力;免疫荧光检测EMT标志物N-cadherin阳性表达;Western blot法测定SIX1、EMT标志蛋白E-cadherin、Vimentin及N-cadherin表达.取A549细胞系及其顺铂耐药细胞株A549/DDP,RT-qPCR及Western blot法检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达.取A549/DDP转染PCAT6-Si与miR-185-Si,并分为A549组、A549/DDP组、PCAT6-Si组、miR-185-Si组、PCAT6-Si+miR-185-Si、eGFP-Si-1组、eGFP-Si-2组;RT-qPCR检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达;CCK-8法检测各组细胞半数抑制浓度(IC50)及耐药指数(RI);Western blot法检测SIX1、耐药相关蛋白P-gp表达;裸鼠荷瘤试验验证PCAT6对A549/DDP细胞化疗敏感性的作用.双荧光素酶试验验证PCAT6与miR-185之间的靶向关系.结果:与A549细胞相比,A549/DDP细胞IC50及RI、lncRNA-PCAT6、SIX1及P-gp表达升高(P<0.05),miR-185表达降低(P<0.05).敲低A549细胞中lncRNA-PCAT6表达后,miR-185表达升高,SIX1蛋白表达降低,细胞侵袭、迁移能力及EMT进程降低,IC50及RI降低、肿瘤体积减小,且各指标变化差异显著(P<0.05).敲低miR-185可逆转lncRNA-PCAT6的上述作用.双荧光素酶报告试验证实lncRNA-PCAT6与miR-185之间有靶向负调控作用.结论:肺癌A549细胞中lncRNA-PCAT6低表达可靶向上调miR-185,下调SIX1,抑制EMT进程,增强对DDP化疗的敏感性.
文献关键词:
长链非编码RNA-PCAT6;微小RNA-185;肺癌A549细胞;化疗敏感性
作者姓名:
王华丽;农开旭;程守斌;秦篙;许振胜
作者机构:
中南大学湘雅医学院附属海口医院呼吸内科,海口570208;中南大学湘雅医学院附属海口医院肿瘤放疗科,海口570208
文献出处:
引用格式:
[1]王华丽;农开旭;程守斌;秦篙;许振胜-.lncRNA-PCAT6通过调控miR-185/SIX1轴对肺癌A549细胞上皮间质转化及化疗敏感性的影响)[J].中国免疫学杂志,2022(23):2840-2846
A类:
Si+miR
B类:
lncRNA,PCAT6,SIX1,A549,细胞上皮间质转化,化疗敏感性,长链非编码,EMT,低表达,腺病毒,病毒载体,eGFP,共转染,qPCR,Transwell,细胞侵袭,迁移能力,免疫荧光检测,cadherin,阳性表达,blot,Vimentin,细胞系,顺铂耐药,耐药细胞株,DDP,CCK,半数抑制浓度,IC50,耐药指数,RI,gp,裸鼠,荷瘤,双荧光素酶,敲低,肿瘤体积,指标变化,述作,负调控
AB值:
0.163089
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