典型文献
circBIRC6通过miR-944/CD44轴促进PD-L1介导的非小细胞肺癌免疫逃逸
文献摘要:
目的:通过观察环状RNA(circRNA)BIRC6(circBIRC6)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达探讨其在肿瘤细胞免疫逃逸中的作用及分子机制.方法:体外培养人NSCLC细胞系(H1975、HCC827、H1650、H1299和A549)和人正常肺上皮细胞系(BEAS-2B),qRT-PCR检测检测circBIRC6、miR-944和分化簇44(CD44)、程序性细胞死亡配体1(PD-L1)的表达.取A549细胞,分为正常对照(NC)组、si-NC组、si-circBIRC6组、si-circBIRC6+anti-NC组、si-circBIRC6+anti-miR-944组.转染48h后,采用qRT-PCR和Western blot检测细胞中circBIRC6、miR-944和CD44、PD-L1的mRNA和蛋白表达水平;MTT法检测细胞增殖活性,Transwell小室检测细胞迁移、侵袭能力;将A549细胞与CD8+T细胞共培养,台盼蓝染色测定共培养系统中CD8+T细胞活力,流式细胞术检测共培养系统中CD8+T细胞凋亡,ELISA法检测共培养细胞培养上清液中可溶性PD-L1(sPD-L1)、干扰素-γ(INF-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、颗粒酶B和穿孔素水平,验证敲低circBIRC6在NSCLC免疫逃逸中的作用.通过双荧光素酶报告(DLRA)、RNA免疫沉淀(RIP)和RNA pull-down实验验证A549细胞中circBIRC6、miR-944和CD44的调控机制.结果:circBIRC6和CD44、PD-L1在NSCLC中呈高表达,miR-944呈低表达.敲低circBIRC6(0.36±0.05比1.01±0.12)可上调miR-944(3.45±0.38比0.99±0.10),抑制CD44 mRNA(0.39±0.05比1.00±0.10)、CD44蛋白(0.25±0.05比0.64±0.07)和PD-L1 mRNA(0.31±0.04比1.00±0.13)、PD-L1蛋白(0.17±0.03比0.52±0.06)表达,降低A549细胞增殖活力和迁移、侵袭能力(均P<0.05).在共培养系统中,敲低circBIRC6的A549细胞可激活CD8+T细胞[(68.35±7.20)%比(35.82±4.14)%],抑制CD8+T细胞凋亡[(23.85±3.76)%比(56.01±6.22)%],降低sPD-L1水平,增加IFN-γ、TNF-α、颗粒酶B和穿孔素水平(均P<0.05).下调miR-944可减弱circBIRC6敲低对A549细胞增殖、迁移和侵袭及CD8+T细胞活化的影响.DLRA、RIP和RNA pull-down实验证实circBIRC6可以靶向并结合A549细胞中的miR-944,且CD44是miR-944的靶标.结论:敲低A549细胞中的circBIRC6可通过下调PD-L1的表达和分泌,激活肿瘤微环境中的CD8+T细胞,进而抑制NSCLC的免疫逃逸;其分子机制可能与miR-944/CD44轴对PD-L1的调控作用有关.
文献关键词:
非小细胞肺癌;环状RNA;circBIRC6;miR-944;分化簇44;程序性细胞死亡配体1;免疫逃逸
中图分类号:
作者姓名:
张田;任丹;李杰
作者机构:
陕西省咸阳市第一人民医院,陕西 咸阳 712000;湖北省第三人民医院肿瘤科,湖北 武汉 430030
文献出处:
引用格式:
[1]张田;任丹;李杰-.circBIRC6通过miR-944/CD44轴促进PD-L1介导的非小细胞肺癌免疫逃逸)[J].河北医学,2022(12):1969-1977
A类:
circBIRC6+anti,DLRA
B类:
miR,CD44,L1,非小细胞肺癌,免疫逃逸,通过观察,circRNA,NSCLC,肿瘤细胞,细胞免疫,体外培养,细胞系,H1975,HCC827,H1650,H1299,A549,肺上皮细胞,BEAS,2B,qRT,分化簇,程序性细胞死亡配体,正常对照,NC,si,转染,48h,blot,蛋白表达水平,MTT,细胞增殖活性,Transwell,小室,细胞迁移,侵袭能力,CD8+T,细胞共培养,台盼蓝,蓝染,共培养系统,细胞活力,流式细胞术,细胞培养,养上,上清液,sPD,干扰素,INF,颗粒酶,穿孔素,敲低,双荧光素酶,免疫沉淀,RIP,pull,down,调控机制,低表达,可上,细胞增殖活力,可激活,IFN,迁移和侵袭,细胞活化,靶标,肿瘤微环境
AB值:
0.245161
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