目的 探讨微小RNA-134(miR-134)靶向叉头盒蛋白M1(FOXM1)对喉鳞癌细胞顺铂(DDP)耐药株FD-LSC-1/DDP的DDP耐药性的影响.方法 体外培养NP69、FD-LSC-1、FD-LSC-1/DDP细胞,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测NP69、FD-LSC-1、FD-LSC-1/DDP细胞中miR-134、FOXM1 mRNA表达水平.将FD-LSC-1/DDP细胞分为空白对照组、miR-134-mimics-NC组(阴性对照组)、miR-134-mimics组(过表达miR-134)、miR-134-mimics+pcDNA组(共转染miR-134-mimics和pcDNA)、miR-134-mimics+pcDNA-FOXM1组(共转染miR-134-mimics和pcDNA-FOXM1).倒置荧光显微镜下观察转染效果;以空白对照组、miR-134-mimics-NC组、miR-134-mimics组FD-LSC-1/DDP细胞为研究对象,以qRT-PCR法检测细胞中miR-134表达;以噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力及对DDP的耐药性;以流式细胞仪检测细胞凋亡率;以蛋白质印迹法检测FOXM1、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞增殖相关核抗原(Ki-67)、B淋巴细胞瘤基因-2(Bcl-2)、胱天蛋白酶-3(caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达.用TargetScan数据库预测miR-134与FOXM1的靶向关系,通过双荧光素酶报告基因实验加以验证并检测miR-134对FOXM1的调控作用.结果 与NP69细胞比较,FD-LSC-1细胞中miR-134表达水平显著降低,FOXM1 mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与FD-LSC-1细胞比较,FD-LSC-1/DDP细胞miR-134表达水平显著降低、FOXM1 mRNA表达水平显著升高(P<0.05).空白对照组、miR-134-mimics-NC组、miR-134-mimics组的miR-134表达水平分别为1.02±0.15,1.01±0.15,1.57±0.23,药物半数抑制浓度(IC50)分别为(24.25±2.05),(23.67±1.78),(8.64±1.57)μg·mL-1,细胞增殖抑制率分别为(17.65±2.66)％,(17.63±2.65)％,(45.87±6.88)％,凋亡率分别为(15.09±2.26)％,(14.97±2.25)％,(38.77±5.82)％,miR-134-mimics组与空白对照组、miR-134-mimics-NC组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).与空白对照组、miR-134-mimics-NC组比较,miR-134-mimics组FD-LSC-1/DDP细胞Bax、caspase-3蛋白表达均显著升高,PCNA、Ki-67、Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(均P<0.05).TargetScan数据库预测显示FOXM1是miR-134的潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实二者存在靶向关系;上调FOXM1逆转了miR-134过表达对FD-LSC-1/DDP细胞顺铂耐药性的作用.结论 过表达miR-134能提高FD-LSC-1/DDP细胞化疗敏感性,可能是通过靶向下调FOXM1表达实现的.

微小RNA-134;叉头盒蛋白M1;喉鳞癌细胞;顺铂耐药性

内蒙古医科大学附属医院耳鼻咽喉科,内蒙古呼和浩特010050

[1]白云飞;崔晓波;王博谦;王亚平;杨莉娜;刘佳荣;覃洁-.微小RNA-134靶向叉头盒蛋白M1对喉鳞癌细胞顺铂耐药性的影响)[J].中国临床药理学杂志,2022(18):2151-2156

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