目的 研究三棱含药血清对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)损伤的影响.方法 SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组和三棱组,制备空白血清及含药血清.建立LPS诱导的HUVEC损伤模型,设置对照组、模型组、5％空白血清组和三棱含药血清(1％、3％、5％)组,采用MTT法检测三棱含药血清对细胞活力的影响;采用荧光显微镜分析各组细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用ELISA法检测各组细胞上清液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cystein-asparateprotease-1,Caspase-1)活性和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1 β,IL-1β)、IL-6、IL-17、组织因子(tissue factor,TF)、血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)、凝血酶调节蛋白(thrombomodulin,TM)水平;采用Western blotting检测各组细胞微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3 Ⅱ),LC3 Ⅱ)、Beclin-1、Parkin和PINK蛋白表达情况;采用qRT-PCR法测定各组细胞IL-1β、IL-18和 NOD 样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)mRNA表达情况.结果 与对照组比较,模型组细胞活力、MPP显著降低(P＜0.01),细胞内ROS水平显著升高(P＜0.01),上清液 LDH、Caspase-1 活性和 TNF-α、IL-6、IL-17、TF、vWF、TM 水平均显著升高(P＜0.01),LC3Ⅱ、Beclin-1、Parkin 和PINK蛋白表达水平均显著升高(P＜0.01),IL-1β、IL-18和NLRP3mRNA表达水平显著升高(P＜0.01).与模型组比较,三棱含药血清组细胞活力、MPP显著升高(P＜0.01),细胞内ROS水平显著降低(P＜0.05、0.01),上清液LDH、Caspase-1活性和 TNF-α、IL-6、IL-17、TF、vWF、TM 水平均显著降低(P＜0.01),LC3 Ⅱ、Beclin-1、Parkin 和 PINK 蛋白表达水平均显著降低(P＜0.01),IL-1β、IL-18和NLRP3mRNA表达水平显著降低(P＜0.01).结论 三棱含药血清具有内皮细胞保护作用,可以降低LPS诱导的细胞氧化损伤和炎症,降低凝血级联反应.

三棱;含药血清;人脐静脉内皮细胞;脂多糖;氧化损伤;炎症

时海燕;孙蓉;徐男

山东第一医科大学第一附属医院(山东省千佛山医院)临床药学,山东省儿童药物临床评价与研发工程技术研究中心,山东省医药卫生临床药学重点实验室,山东济南 250014;山东大学高等医学研究院,山东济南 250014;山东省中医药研究院中药制剂研究所,山东济南 250014

中草药

[1]时海燕;孙蓉;徐男-.三棱含药血清对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用研究)[J].中草药,2022(07):2064-2070

asparateprotease

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