该项目拟在前期已证明盘龙七片有效治疗椎动脉型颈椎病(vertebral artery type of cervical spondylosis,CSA)的基础上,采用网络药理学整合动物实验验证的研究策略进一步探索相关作用机制.运用生物网络分析建立药物-疾病互作网络,发现盘龙七片的关键候选靶标富集多条与CSA病理环节相关通路,其中磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(protein kinase B,AKT/PKB)信号通路富集程度最为显著.进一步,采用混合造模法建立CSA大鼠模型,设正常组,模型组,盘龙七片低、中、高剂量(0.16、0.32、0.64g·kg-1)组和颈复康颗粒(1.35 g·kg-1)组,造模成功后连续给药8周,苏木素-伊红染色法检测大鼠颈椎肌肉组织的病理改变,酶联免疫吸附法检测大鼠血清和/或颈椎组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1 β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、CC趋化因子配体2[chemokine(C-C motif)ligand 2,CCL2]含量变化,免疫印迹法检测大鼠颈椎组织中CC 趋化因子受体 2[chemokine(C-C motif)receptor 2,CCR2]、PI3K、AKT、磷酸化丝氨酸-苏氨酸激酶(phosphorylation-protein kinase B)、IκB 激酶β(I-kappa-B-kinase beta,IKK-beta/IKKβ)、核转录因子 κB(nuclear factor kappa B,NF-κB P65)和磷酸化核转录因子κB(phosphorylation-nuclear factor kappa B,p-NF-κB P65)的蛋白表达水平,免疫荧光法检测大鼠颈椎肌肉组织中p-NF-κB P65的阳性表达情况.结果表明盘龙七片不同剂量组可有效改善CSA大鼠颈椎肌肉组织中肌纤维变性和炎症病变程度,降低血清和/或颈椎组织中炎性因子IL-1β、TNF-α、VEGF、CCL2和CCR2含量,下调颈椎组织中PI3K、p-AKT、IKKβ和p-NF-κB P65蛋白表达含量以及p-NF-κB P65入核水平.表明了盘龙七片口服能显著抑制CSA大鼠的炎症反应,其作用机制可能与下调PI3K/AKT信号通路活化有关.

盘龙七片;椎动脉型颈椎病;网络药理学;炎症通路

明瑞蕊;张彦琼;徐颖;徐腾腾;方罗昌婷;王金霞;王潇潇;胡智星;杨超;贾可欣;王璐;刘春芳;林娜

中国中医科学院中药研究所,北京100700

中国中药杂志

[1]明瑞蕊;张彦琼;徐颖;徐腾腾;方罗昌婷;王金霞;王潇潇;胡智星;杨超;贾可欣;王璐;刘春芳;林娜-.基于网络药理学和实验验证探讨盘龙七片从PI3K/AKT信号通路干预大鼠椎动脉型颈椎病的机制)[J].中国中药杂志,2022(16):4454-4461

生物网络分析

网络药理学,盘龙七片,PI3K,AKT,椎动脉型颈椎病,明盘,vertebral,artery,type,cervical,spondylosis,CSA,动物实验验证,研究策略,疾病互作,互作网络,靶标,多条,相关通路,磷脂酰肌醇,phosphatidylinositol,kinase,丝氨酸,苏氨酸,protein,PKB,信号通路富集,大鼠模型,高剂量,64g,颈复康颗粒,连续给药,苏木,木素,伊红,染色法,肌肉组织,病理改变,酶联免疫吸附法,大鼠血清,interleukin,tumor,necrosis,血管内皮细胞生长因子,vascular,endothelial,growth,VEGF,趋化因子配体,chemokine,motif,ligand,CCL2,含量变化,免疫印迹法,趋化因子受体,receptor,CCR2,磷酸化,phosphorylation,kappa,beta,IKK,核转录因子,nuclear,P65,蛋白表达水平,免疫荧光法,阳性表达,不同剂量,肌纤维,病变程度,低血清,炎性因子,炎症通路

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