目的 研究抑瘤汤对上皮性卵巢癌中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的作用.方法 通过免疫组化法比较人体的良性肿物和卵巢癌组织中NLRP3和白细胞介素(IL)-1β的表达水平;体外培养人上皮性卵巢癌细胞系A2780,分成对照组、化疗(给予DMSO溶解的紫杉醇100nmol·L-1)组、化疗+抑瘤汤(1、10、100mg·L-1)组,对照组加入等量DMSO,干预12、24、48、72h后,CCK-8法检测细胞存活率,选取合适的抑瘤汤浓度及干预时间进行后续实验;Western blotting法检测NLRP3的蛋白表达;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和IL-1β的mRNA水平;ELISA法检测细胞上清液中NLRP3、Caspase-1、ASC和IL-1β蛋白水平.结果 与卵巢良性肿物组相比,卵巢癌患者的卵巢组织中NLRP3及IL-1β蛋白表达显著上调(P＜0.05);干预24、48、72h1后,与对照组相比,化疗组的细胞存活率显著降低(P＜0.05、0.001);与化疗组相比,化疗+100 mg-L-1抑瘤汤组的细胞存活率显著降低(P＜0.01、0.001),选取100mg·L-1抑瘤汤干预48h进行后续研究.与对照组相比,化疗组的细胞中NLRP3蛋白表达水平降低,但无统计学意义;与对照组及化疗组相比,化疗+抑瘤汤组的细胞中NLRP3蛋白表达水平显著降低(P＜0.05、0.001).与对照组相比,化疗组和化疗+抑瘤汤组的NLRP3mRNA和上清中蛋白水平显著降低(P＜0.05、0.001);与化疗组相比,化疗+抑瘤汤组的NLRP3mRNA和上清中蛋白水平显著降低(P＜0.05).与对照组相比,化疗组的Caspase-1、ASC、IL-1β的mRNA水平降低,但无统计学意义;化疗+抑瘤汤组的Caspase-1、ASC、IL-1βmRNA水平显著降低(P＜0.05).与对照组相比,化疗组和化疗+抑瘤汤组细胞上清中的Caspase-1、ASC、IL-1β蛋白水平显著降低(P＜0.01、0.001);与化疗组相比,化疗+抑瘤汤组的Caspase-1、ASC、IL-1β蛋白进一步降低,其中Caspase-1、ASC差异显著(P＜0.05、0.001).结论 NLRP3炎症小体在卵巢癌中高表达,抑瘤汤可抑制卵巢癌细胞NLRP3炎症小体的表达.

抑瘤汤;上皮性卵巢癌;NLRP3炎症小体;半胱氨酸蛋白酶-1;凋亡相关斑点样蛋白;白细胞介素-1β

洪金妮;林达涛;陈仔颖;陈捷

福建中医药大学附属人民医院妇科,福建福州 350004;广东省人民医院(广东省医学科学院)中医科,广东广州 510080;中山大学中山医学院寄生虫学教研室,广东广州 510080

药物评价研究

[1]洪金妮;林达涛;陈仔颖;陈捷-.基于NLRP3炎症小体的抑瘤汤联合紫杉醇对上皮性卵巢癌的作用研究)[J].药物评价研究,2022(12):2515-2521

72h1

炎症小体,抑瘤汤,紫杉醇,上皮性卵巢癌,NOD,样受体,体热,蛋白结构域,免疫组化法,良性肿物,卵巢癌组织,体外培养,卵巢癌细胞,细胞系,A2780,DMSO,100nmol,100mg,等量,CCK,细胞存活率,blotting,qRT,半胱氨酸蛋白酶,Caspase,凋亡相关斑点样蛋白,ASC,上清液,卵巢癌患者,卵巢组织,+100,48h,蛋白表达水平,平降,NLRP3mRNA,可抑制

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