该研究基于Keap1/Nrf2与TLR4/NF-κB p65信号通路研究藏族药二十五味松石丸(Ershiwuwei Songshi Pills,ESP)改善对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)致小鼠肝损伤的作用机制.将昆明小鼠随机分为空白组,模型组,二十五味松石丸高(400 mg·kg-1)、中(200 mg·kg-1)、低(100 mg·kg-1)剂量组和乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)组.各给药组小鼠均连续给药14 d后,除空白组外,其余各组小鼠腹腔注射200 mg·kg-1 APAP,12 h后收集小鼠血清与肝脏组织.通过肝脏病理切片苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE),并检测小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)水平以及肝组织匀浆中谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)水平,观察与分析二十五味松石丸对APAP致小鼠肝损伤的保护作用.通过ELISA法测定小鼠血清中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素(interleukin-1 beta,IL-1β)与(interleukin-6,IL-6)水平,Western blot法测定小鼠肝细胞核内核转录因子E2相关因子2(nuclear transcription factor E2 related factor 2,Nrf2)、细胞质kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)、肝脏内Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)以及细胞核内核因子-κB p65(nuclear factor-kappa B,NF-κB p65)蛋白表达,实时荧光定量PCR测定小鼠肝脏中谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(glutamate-cysteine ligase catalytic subunit,GCLC)、谷氨酸半胱氨酸连接酶调节亚基(glutamate-cysteine ligase regulatory subunit,GCLM)、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、还原型辅酶/醌氧化还原酶[NAD(P)H dehydrogenase quinone 1,NQO-1]基因mRNA相对表达水平,初步探究藏族药二十五味松石丸改善APAP致小鼠肝损伤的作用机制.结果显示,与模型组相比,二十五味松石丸给药组小鼠肝脏病理损伤程度有所改善;血清中AST、ALT水平有所降低;肝脏中GSH、SOD、CAT、T-AOC水平有所升高,MDA、MPO有所降低;血清TNF-α、IL-6水平有所降低;小鼠肝脏细胞质Keap1、细胞核NF-κB p65表达有所减少,细胞核Nrf2表达有所增加,肝脏TLR4表达无显著性差异;GCLC、GCLM、HO-1、NQO-1等抗氧化基因mRNA相对表达量也有所增加.研究结果表明,二十五味松石丸可减轻APAP引起的氧化损伤与炎症反应,其作用机制可能与Keap1/Nrf2信号通路以及TLR4/NF-κB p65通路上的信号转导因子有关.

藏族药;二十五味松石丸;对乙酰氨基酚;信号通路;核转录因子E2相关因子2;核因子-κB p65

沙玉茹;罗晓敏;丁翼;杨斌;简程芳;龚普阳;顾健;谭睿

西南民族大学 药学院, 四川 成都610041;西南交通大学 生命科学与工程学院, 四川 成都610031

中国中药杂志

[1]沙玉茹;罗晓敏;丁翼;杨斌;简程芳;龚普阳;顾健;谭睿-.基于Keap1/Nrf2与TLR4/NF-κB p65信号通路研究藏族药二十五味松石丸改善对乙酰氨基酚致小鼠肝损伤的作用机制)[J].中国中药杂志,2022(08):2049-2055

藏族药二十五味松石丸,二十五味松石丸,Ershiwuwei,Songshi

Keap1,Nrf2,TLR4,p65,对乙酰氨基酚,肝损伤,Pills,ESP,acetaminophen,APAP,昆明小鼠,乙酰半胱氨酸,acetyl,cysteine,NAC,药组,连续给药,小鼠腹腔,腹腔注射,小鼠血清,肝脏组织,肝脏病理,病理切片,苏木,木精,伊红,hematoxylin,eosin,staining,HE,中天,天冬氨酸氨基转移酶,aspartate,aminotransferase,AST,丙氨酸氨基转移酶,alanine,ALT,肝组织,匀浆,中谷,谷胱甘肽,glutathione,GSH,malondialdehyde,superoxide,dismutase,过氧化氢酶,catalase,CAT,髓过氧化物酶,myeloperoxidase,MPO,总抗氧化能力,total,antioxidant,capacity,AOC,观察与分析,tumor,necrosis,alpha,interleukin,beta,blot,肝细胞,细胞核,核转录因子,E2,相关因子,nuclear,transcription,related,细胞质,kelch,环氧氯丙烷,like,ECH,associated,protein,Toll,样受体,receptor,核因子,kappa,小鼠肝脏,谷氨酸,连接酶,酶催化,催化亚基,glutamate,ligase,catalytic,subunit,GCLC,调节亚基,regulatory,GCLM,血红素氧合酶,heme,oxygenase,HO,还原型,辅酶,氧化还原酶,NAD,dehydrogenase,quinone,NQO,病理损伤,有所改善,肝脏细胞,相对表达量,可减轻,氧化损伤,信号转导

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