探究杜鹃花总黄酮(total flavonoids of Rhododendron simsii,TFR)减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)的保护作用及其与钙离子传感器基质相互作用分子(stromal interaction molecule,STIM)和钙释放激活钙通道调节分子(calcium release-activated calcium modulator,Orai)调控的钙库操作性钙离子内流(store-operated calcium entry,SOCE)通路之间的关系.大鼠随机分为假手术(sham)组、模型(MCAO)组、TFR(60 mg·kg-1)组、TFR(60 mg·kg-1)+SOCE通路阻断剂 2-氨基乙基联苯基硼酸酯(2-aminoethoxydiphenyl borate,2-APB)(2.5 mg·kg-1)组、2-APB(2.5 mg·kg-1)组.sham 组、MCAO组大鼠给予生理盐水,用药组给予TFR(60 mg·kg-1),连续灌胃14 d直至取材,SOCE通道阻断剂2-APB(2.5 mg·kg-1)术后给予腹腔注射.ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的活性;TTC染色检测大鼠的脑组织梗死情况;HE染色检测大鼠缺血脑组织的病理状况;Western blot和RT-qPCR技术分别检测脑组织STIM1、STIM2、Orai1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,caspase-3)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)的蛋白及mRNA表达水平;免疫荧光检测大鼠脑神经元的生长情况.结果显示,相较于MCAO组TFR组大鼠神经功能评分明显降低,脑组织病理损伤显著改善,梗死面积明显减少,血清中IL-1、IL-6、TNF-α的活性显著降低,脑组织中STIM1、STIM2、Orai1、PKB蛋白及mRNA表达显著上调,caspase-3表达显著下调,在荧光显微镜下可观察到双标阳性细胞增多;而加入2-APB后,以上作用明显减弱.综上结果表明,TFR可能通过上调SOCE通道相关信号分子的基因表达,诱导缺血区周边的神经发生,改善缺血区周边的神经元生存状态,抑制炎症因子活性,从而发挥对抗局灶性脑缺血再灌注损伤的作用.

杜鹃花总黄酮;脑缺血再灌注损伤;SOCE通道;STIM;Orai

陆嘉珺;姜晨晨;施磊;赫玉香;王书凡;尹秀云;陈卓;曹迪;胡浩然;韩军

国家中医药管理局中药药理三级实验室,安徽 芜湖241002;皖南医学院药物研发中心药学院,安徽芜湖241002;安徽省皖南地区植物药活性物质筛选与再评价工程实验室,安徽芜湖241002;安徽省多糖药物工程技术研究中心,安徽芜湖241002

中国中药杂志

[1]陆嘉珺;姜晨晨;施磊;赫玉香;王书凡;尹秀云;陈卓;曹迪;胡浩然;韩军-.杜鹃花总黄酮通过SOCE通路减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用)[J].中国中药杂志,2022(14):3828-3836

杜鹃花总黄酮,Orai,+SOCE,aminoethoxydiphenyl,STIM2

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