目的:观察补肾化痰祛瘀汤对外源性神经毒性物质丙烯醛所诱导的SD大鼠神经毒性模型及HT22海马神经元毒性模型的神经保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法:(1)体内实验.将SD大鼠随机分为空白对照组、中药对照组、丙烯醛模型组、中药治疗组、多奈哌齐治疗组,并给予相应药物灌胃.采用Morris水迷宫观察各组大鼠学习记忆功能,HE染色法观察大鼠海马CA1区神经元病理改变,Western blotting法检测各组大鼠海马组织中BDNF、TrkB、APP、ADAM10蛋白表达水平.(2)体外实验.体外培养HT22细胞,将HT22细胞随机分为空白对照组、模型组、2％中药组、3％中药组、5％中药组、10％中药组、多奈哌齐组,空白对照组和模型组加入空白血清,给药组加入含药血清1 h后,加入25μmol/L丙烯醛,24h后采用MTT法检测各组细胞相对存活率.采用Western blotting法检测HT22细胞中BDNF、TrkB、APP、ADAM10蛋白表达水平.结果:(1)体内实验.与空白对照组比较,丙烯醛模型组大鼠穿越平台次数明显减少(P＜0.01),航行时间明显延长(P＜0.01);海马CA1区神经元损害更为严重;同时海马组织中BDNF、TrkB、ADAM10蛋白相对表达量均明显降低(P＜0.01),APP蛋白相对表达量明显升高(P＜0.01).与丙烯醛模型组比较,中药治疗组大鼠的平台穿越次数均明显增加(P＜0.05),航行时间明显缩短(P＜0.0l);海马CA1区神经元形态明显改善;同时海马组织中BDNF、TrkB、ADAM 10蛋白相对表达量均明显升高(P＜0.05),APP蛋白相对表达量明显降低(P＜0.05).(2)体外实验.与空白对照组比较,除10％中药组细胞存活率明显降低(P＜0.01)外,2％、3％、5％中药及10μm11ol/L多奈哌齐均可促进细胞增殖;与模型组比较,5％中药组和多奈哌齐组均可明显改善HT22细胞活力(P＜0.01),同时提高细胞中BDNF、TrkB、ADAM10蛋白相对表达量(P＜0.01),降低APP蛋白相对表达量(P＜0.05).体外实验结果与和体内实验结果类似.结论:补肾化痰祛瘀汤可以改善丙烯醛诱导的SD大鼠学习记忆能力损害和海马CA1区神经元的病理改变,提高丙烯醛诱导的HT22神经元毒性模型的细胞存活率,提示其可对抗丙烯醛的神经毒性,具有神经保护作用,且其机制可能与激活BDNF/TrkB通路、增加ADAM10、减少APP水平有关.

阿尔茨海默病;补肾化痰祛瘀汤;丙烯醛;HT22细胞;BDNF/TrkB信号通路;大鼠

展昆;周丽娟;刘瑞琦;伍新林;刘嘉辉;黄颖娟

中山大学附属第一医院,广东 广州 510080

中医药导报

[1]展昆;周丽娟;刘瑞琦;伍新林;刘嘉辉;黄颖娟-.补肾化痰祛瘀汤的神经保护作用及其机制探究)[J].中医药导报,2022(10):12-17

补肾化痰祛瘀汤

神经保护作用,机制探究,外源性,神经毒性物质,丙烯醛,HT22,海马神经元,体内实验,空白对照,药对,中药治疗,多奈哌齐,灌胃,Morris,水迷宫,宫观,学习记忆功能,HE,染色法,CA1,病理改变,blotting,海马组织,BDNF,TrkB,ADAM10,蛋白表达水平,体外实验,体外培养,药组,白血,含药血清,24h,MTT,台次,航行,更为严重,白相,相对表达量,越次,0l,细胞存活率,m11ol,细胞活力,果类,学习记忆能力,有神,阿尔茨海默病

0.178305