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调控猪ETV5基因miRNA的筛选鉴定
文献摘要：
ETV5是在精原干细胞自我更新和维持中起到关键作用的转录因子.为筛选出调控猪ETV5基因的miRNA,利用在线分析软件TargetScan、miRanda预测调控ETV5基因的miRNA,采用双荧光素酶活性检测对筛选出来的保守miRNA进行验证,筛选出miR-19后采用miR-19模拟物mimics和抑制物inhibitor分别转染猪胎儿成纤维细胞和睾丸支持细胞,荧光定量检测ETV5的表达,同时在猪胎儿成纤维细胞中对ETV5基因进行敲除,检测miR-19的表达变化.结果表明,miR-19可通过与ETV53'UTR区结合显著降低细胞中荧光素酶的活性(P<0.01);细胞转染结果显示miR-19 mimcs可显著降低猪胎儿成纤维细胞和睾丸支持细胞中ETV5的表达,miR-19 inhibitor则结果相反(P<0.01);在胎儿成纤维细胞中对ETV5基因进行敲除后,miR-19的表达极显著提高(P<0.01).miR-19对猪ETV5基因的表达具有调控作用,为进一步开展miRNA调控猪ETV5基因影响猪生殖方面的研究提供参考.
文献关键词：
miR-19;猪;ETV5;睾丸
中图分类号：
作者姓名：
李虹仪;彭国良;肖正中;张茂
作者机构：
韶关学院英东生物与农业学院,韶关 512005
文献出处：
引用格式：
[1]李虹仪;彭国良;肖正中;张茂-.调控猪ETV5基因miRNA的筛选鉴定)[J].生物技术通报,2022(05):169-174
A类：
ETV5,ETV53
B类：
miRNA,筛选鉴定,精原干细胞,自我更新,出调,在线分析,TargetScan,miRanda,测调,双荧光素酶,荧光素酶活性,活性检测,mimics,抑制物,inhibitor,猪胎儿成纤维细胞,睾丸支持细胞,荧光定量检测,敲除,表达变化,UTR,细胞转染,mimcs
AB值：
0.245485
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