典型文献
鸡Atg5基因过表达载体的构建与功能验证
文献摘要：
鸡肉占肉质消费品首位,过多的脂质沉积会降低肉质.研究表明自噬参与肝脏脂质代谢,改善脂质沉积,从而调控禽类脂质代谢.本研究旨在探究自噬相关基因5(autophagy related gene 5,Atg5)对鸡(Gallus gallus)成纤维细胞系DF-1细胞内的脂质代谢相关基因的影响.根据NCBI数据库中鸡ATG5蛋白(NP_001006409.1)氨基酸序列,利用ExPASy数据库对鸡ATG5蛋白进行理化特性分析;利用qPCR技术检测鸡各组织中Atg5基因的表达情况;构建过表达重组质粒pcDNA3.1-Atg5,并且利用RNAi技术干扰Atg5表达;最后,检测干扰和过表达Atg5后相关脂代谢基因:载脂蛋白B(apolipoprotein,ApoB)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl CoA carboxylase,ACACA)、过氧化物酶体增殖物激活受体-α(peroxisome proliferator-activated receptor-α,PPARα)、叉头转录因子-1(forkhead box protein-1,Foxo1)、脂肪酸结合蛋白7(fatty acid-binding protein 7,FABP7)、分拣蛋白1(sortilin 1,Sort1)的表达情况;结果表明:鸡ATG5蛋白是相对分子质量为32.478 kD的不稳定蛋白质,Atg5在各组织中均有表达,其中以胸肌组织中表达量最高;此外,成功构建过表达载体pcDNA3.1-Atg5,筛选出最优干扰siRNA—siRNA-330,过表达或干扰Atg5基因对其他脂代谢相关基因的表达情况均有影响;其中,过表达Atg5后,ApoB的表达量显著降低,Sort1的表达量显著增加,FABP7变化不显著;干扰Atg5后,FABP7和ApoB的表达量显著提高,Sort1变化不显著,推测三者与Atg5可能存在潜在联系.本研究为进一步研究鸡Atg5基因的功能提供参考依据.
文献关键词：
自噬相关基因5(Atg5);自噬;脂质代谢;鸡
中图分类号：
作者姓名：
韩琪;王茜倩;徐钰芳;郁建锋;徐璐;顾志良
作者机构：
常熟理工学院生物与食品工程学院,常熟215500
文献出处：
引用格式：
[1]韩琪;王茜倩;徐钰芳;郁建锋;徐璐;顾志良-.鸡Atg5基因过表达载体的构建与功能验证)[J].农业生物技术学报,2022(04):716-725
A类：
分拣蛋白,Sort1
B类：
Atg5,基因过表达,过表达载体,功能验证,鸡肉,肉质,消费品,脂质沉积,肝脏脂质代谢,禽类,类脂,自噬相关基因,autophagy,related,gene,Gallus,gallus,成纤维细胞,细胞系,DF,脂质代谢相关基因,NCBI,ATG5,NP,氨基酸序列,ExPASy,理化特性,qPCR,重组质粒,pcDNA3,RNAi,代谢基因,载脂蛋白,apolipoprotein,ApoB,脂肪酸合成酶,fatty,acid,synthase,FASN,辅酶,羧化酶,acetyl,CoA,carboxylase,ACACA,过氧化物酶体增殖物激活受体,peroxisome,proliferator,activated,receptor,PPAR,叉头转录因子,forkhead,Foxo1,脂肪酸结合蛋白,binding,FABP7,sortilin,相对分子质量,kD,胸肌,肌组织,组织中表达,siRNA,脂代谢相关基因
AB值：
0.403128
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