典型文献
代谢工程改造热带假丝酵母生产1,2,4-丁三醇
文献摘要:
[背景]1,2,4-丁三醇属于手性多羟基醇,是一种重要的有机合成的化学中间体,以木糖为原料经四步酶反应是目前研究最多的生物合成路线.然而大肠杆菌的鲁棒性较弱,对发酵液中一些抑制剂的耐受性不是很好,同时存在严重的碳代谢抑制.近年来,鲁棒性较好的酵母菌成为更有吸引力的宿主,其中热带假丝酵母具有天然的木糖代谢途径,可以更好地利用木糖.[目的]在热带假丝酵母中构建从木糖到1,2,4-丁三醇的代谢途径.[方法]在热带假丝酵母中敲除木糖还原酶基因GRE3,从而阻断自身的木糖代谢途径.将来源于Caulobacter crescentus的木糖脱氢酶基因(xylB)和木糖酸脱水酶基因(xylD)及来源于Lactococcus lactis的酮酸脱羧酶基因(kdcA)克隆至C.tropicalis 207中,得到重组菌C.tropicalis BT,在此基础上考察重组菌代谢木糖合成1,2,4-丁三醇的能力,确定限速步骤,并通过增加关键基因xylD与kdcA的拷贝数提高1,2,4-丁三醇产量.[结果]在30aC、200 r/min、接种量1%、以30 g/L木糖为底物的情况下,重组菌的1,2,4-丁三醇的产量达到了 1.2 g/L,在5 L发酵罐中的产量达到了 3.7 g/L.[结论]在热带假丝酵母中实现以木糖为底物的1,2,4-丁三醇代谢途径,并通过在基因组上增加关键基因xylD与kdcA的拷贝数,获得了一株高产1,2,4-丁三醇的重组酵母菌株,这为后续在热带假丝酵母中进一步提高1,2,4-丁三醇产量奠定了基础.
文献关键词:
木糖;1;2;4-丁三醇;热带假丝酵母;木糖酸脱水酶
中图分类号:
作者姓名:
张琳;夏媛媛;杨海泉;陈献忠;曹钰
作者机构:
江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122
文献出处:
引用格式:
[1]张琳;夏媛媛;杨海泉;陈献忠;曹钰-.代谢工程改造热带假丝酵母生产1,2,4-丁三醇)[J].微生物学通报,2022(09):3555-3566
A类:
GRE3,xylB,木糖酸脱水酶,xylD,kdcA,30aC
B类:
代谢工程改造,热带假丝酵母,丁三醇,手性,多羟基,有机合成,中间体,四步,生物合成,合成路线,大肠杆菌,发酵液,耐受性,碳代谢,有吸引力,宿主,糖代谢途径,敲除,还原酶,酶基因,Caulobacter,crescentus,Lactococcus,lactis,酮酸,脱羧酶,tropicalis,BT,限速,关键基因,拷贝数,接种量,底物,发酵罐,罐中,一株,株高,重组酵母,酵母菌株
AB值:
0.253344
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