典型文献
毕赤酵母截短PGK1启动子与不同终止子组合调控外源基因表达
文献摘要：
[目的]调控多基因表达对于优化代谢途径和合成生物学应用至关重要,构建不同的启动子和终止子组合,可作为毕赤酵母代谢途径改造和优化外源基因表达的有力分子调控工具.[方法]首先,将毕赤酵母组成型磷酸甘油酸激酶基因的启动子PPGK1进行截短,构建截短启动子分别调控报告基因(绿色荧光蛋白基因egfp和β-半乳糖苷酶基因lacZ)表达的毕赤酵母重组菌.检测重组菌的报告基团转录水平、荧光强度和β-半乳糖苷酶产量.然后,构建了不同强度启动子和终止子组合(共27种组合)调控egfp表达的重组菌.最后,选取能调控基因高、中、低表达的6个启动子-终止子组合,调控β-呋喃果糖苷酶基因表达,构建β-呋喃果糖苷酶分泌表达的重组菌.[结果]构建的截短启动子(PPP、PPE、PPG和PPD)的强度是野生型启动子PPGK1的70％-190％,最强的启动子为PPD.分别与9个终止子组合时,PPG、PPE和PPD启动子驱动egfp基因表达的强度最高的和最低的相比分别达到4倍、7倍和10倍.6个启动子-终止子组合调控β-呋喃果糖苷酶分泌表达的重组菌胞外酶产量最高的和最低的相比可达6倍.[结论]构建了不同的启动子-终止子组合,调控基因表达水平最高的和最低的相比达到10倍,可为优化毕赤酵母代谢工程和合成生物学应用中控制不同外源基因的表达量提供有力的分子工具.
文献关键词：
毕赤酵母;终止子;代谢工程;合成生物学;β-呋喃果糖苷酶
中图分类号：
作者姓名：
张慧杰;廖思敏;凌小翠;冯家勋;秦秀林
作者机构：
广西大学生命科学与技术学院,广西微生物与酶工程技术研究中心,亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西南宁530004
文献出处：
引用格式：
[1]张慧杰;廖思敏;凌小翠;冯家勋;秦秀林-.毕赤酵母截短PGK1启动子与不同终止子组合调控外源基因表达)[J].微生物学报,2022(07):2642-2657
A类：
PPGK1,egfp,果糖苷酶
B类：
启动子,终止子,子组,组合调控,外源基因,多基因,代谢途径,合成生物学,化外,分子调控,磷酸甘油,甘油酸,报告基因,绿色荧光蛋白,半乳糖,lacZ,毕赤酵母重组菌,基团,转录水平,荧光强度,不同强度,调控基因,低表达,呋喃,酶基因表达,分泌表达,PPP,PPE,PPD,野生型,胞外酶,基因表达水平,比达,代谢工程,中控
AB值：
0.205133
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