[目的]以黄河鲤为材料,从其肠道内分离具有产β-甘露聚糖酶功能的益生菌.[方法]采用平板水解圈法初筛,摇瓶发酵法复筛获得产β-甘露聚糖酶的菌株,通过形态学观察、生理生化试验、16SrRNA基因序列和比较基因组分析对该菌株进行鉴定,并用DNS定糖法测定酶学活性,用耐高温、耐酸、耐胆盐和平板打孔扩散法对其益生特性进行研究,用滤纸片法、腹腔注射法等对其生物安全性进行评价.[结果]本研究通过刚果红染色从鲤肠道中分离筛选出产β-甘露聚糖酶的细菌62株,其中HF-14109菌株产酶能力最强.通过形态学观察、生理生化试验、16S rRNA基因序列和比较基因组分析对该菌株进行鉴定,确定该菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis).酶学性质研究发现,该酶最适反应温度为45℃、最适pH为6.0,在温度20-80℃、pH 4.0-9.0范围内都较为稳定;Cu2+、Fe3+、Zn2+、Ba2+对该酶具有激活作用,而Mn2+、Ca2+对该酶具有抑制作用;对魔芋粉、瓜尔胶和槐豆胶都有较好的降解能力.生物学特性研究表明,HF-14109对酸、高温、胆盐具有较好的耐性,对大肠杆菌(Escherichia coli)EC 05、迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)ET 03、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)SA 16、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)Ah 01等均有抑制作用.安全性评价显示,用107、108、109浓度HF-14109菌悬液对黄河鲤腹腔注射后,未出现死亡及异常状况;该菌株对庆大霉素、卡那霉素、克林霉素、氯霉素、红霉素、链霉素、四环素、万古霉素、氨苄西林等均不具有耐药性.[结论]本研究从黄河鲤(Cyprinus carpio)肠道筛选到一株产β-甘露聚糖酶的贝莱斯芽孢杆菌HF-14109,具有较高的酶活性和良好的酶学性质、益生特性和安全性,可作为潜在消除水产饲料中甘露聚糖抗营养因子的功能益生菌.

贝莱斯芽孢杆菌;β-甘露聚糖酶;肠道细菌;酶学性质;功能益生菌

张建新;陈永艳;和子涵;武婧玉;李梦;黄梦媛;孟晓林;常绪路;冯军厂

河南师范大学水产学院,河南省水产动物养殖工程技术研究中心,河南新乡453007

微生物学报

[1]张建新;陈永艳;和子涵;武婧玉;李梦;黄梦媛;孟晓林;常绪路;冯军厂-.鲤源产β-甘露聚糖酶Bacillus velezensis HF-14109的分离鉴定及其酶学和生物学特性研究)[J].微生物学报,2022(08):3062-3078

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