典型文献
基于18S rRNA的胎毛滴虫感染PCR诊断方法的建立
文献摘要：
根据GenBank已发表的胎毛滴虫18S rRNA基因序列设计合成引物,建立胎毛滴虫PCR检测方法.以胎毛滴虫阳性重组质粒pUCm-T-TF18S为模板,以猫贾第虫基因组DNA、猫球虫基因组DNA、猫细小病毒基因组DNA、猫冠状病毒基因组cDNA为对照进行PCR检测,分析该方法的特异性.将胎毛滴虫阳性重组质粒以10倍为梯度稀释成8个不同浓度,进行PCR检测,分析该方法的敏感性.取分别置于-20℃3、6、9、12个月的pUCm-T-TF18S质粒进行PCR检测,分析该方法的稳定性.用建立的PCR检测方法对20份猫粪样进行检测,并与镜检结果进行对比.结果显示,重组质粒pUCm-T-TF18S PCR扩增后出现特异性条带.测序结果表明,产物序列长度为1 264 bp,经BLAST序列比对分析,与猫源胎毛滴虫(GenBank登录号M81842.1)序列一致性为99.53％.建立的胎毛滴虫PCR检测方法与猫球虫、猫贾第虫、猫冠状病毒、猫细小病毒均无交叉反应;可检测的最低模板浓度为4.52×105拷贝/μl;胎毛滴虫pUCm-T-TF18S质粒在-20℃冰箱放置12个月后仍可检测出目的条带.该方法从20份猫粪样中检出16份胎毛滴虫核酸阳性,较传统显微镜检查结果(13份)更为准确、敏感.提示建立的胎毛滴虫PCR检测方法特异性强、敏感性高、稳定性强,可用于临床上胎毛滴虫的检测与流行病学的调查.
文献关键词：
猫;胎毛滴虫;PCR;诊断方法
中图分类号：
作者姓名：
刘继兵;赵洪喜
作者机构：
宁夏大学农学院,银川750021
文献出处：
引用格式：
[1]刘继兵;赵洪喜-.基于18S rRNA的胎毛滴虫感染PCR诊断方法的建立)[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2022(05):682-685
A类：
pUCm,TF18S,M81842
B类：
rRNA,胎毛滴虫,滴虫感染,GenBank,基因序列,序列设计,设计合成,引物,重组质粒,贾第虫,球虫,猫细小病毒,病毒基因组,猫冠状病毒,cDNA,照进,梯度稀释,取分,粪样,条带,bp,BLAST,序列比对,比对分析,登录号,序列一致性,交叉反应,拷贝,冰箱,显微镜检查,法特
AB值：
0.171065
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