典型文献
鸭坦布苏病毒快速实时荧光RT-LAMP方法的建立及初步应用
文献摘要:
为建立检测鸭坦布苏病毒(DTMUV)的荧光逆转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)检测方法,根据DTMUV NS5基因保守序列设计1套特异性引物,对反应时间和温度进行优化,并评价该方法的特异性、敏感性、重复性和临床适用性.结果显示:建立的荧光RT-LAMP最优反应条件为65℃25 min;只特异性扩增DTMUV,而不扩增其他几种禽类病毒;最低检测限为4×102 copies/μL,与qRT-PCR方法敏感性一致,是普通RT-PCR的100倍;批内和批间重复性高;应用该方法检测DTMUV不同剂量人工感染鸭肝脏样品,对接毒剂量为103.7 TCID50和102.7 TCID50组的阳性检出率均为100%,对接毒量101.7 TCID50组的阳性检出率为90%(9/10).结果表明,本研究建立的荧光RT-LAMP检测方法特异性强、重复性好、敏感性高,可成为快速诊断DTMUV的方法之一.
文献关键词:
鸭坦布苏病毒;实时荧光;环介导等温扩增技术;NS5基因
中图分类号:
作者姓名:
王巧萍;粟柯衡;元正菊;常志顺;张薇;张以芳;信爱国
作者机构:
云南农业大学动物医学院,云南昆明 650201;云南省畜牧兽医科学院养禽与禽病研究所,云南昆明 650224;云南瑞栢泰生物科技有限公司,云南昆明 650041
文献出处:
引用格式:
[1]王巧萍;粟柯衡;元正菊;常志顺;张薇;张以芳;信爱国-.鸭坦布苏病毒快速实时荧光RT-LAMP方法的建立及初步应用)[J].中国动物检疫,2022(05):103-109
A类:
B类:
鸭坦布苏病毒,LAMP,初步应用,DTMUV,逆转录,reverse,transcription,loop,mediated,isothermal,amplification,NS5,保守序列,序列设计,特异性引物,反应条件,种禽,禽类,类病毒,检测限,copies,qRT,不同剂量,人工感染,毒剂,TCID50,阳性检出率,法特,快速诊断,环介导等温扩增技术
AB值:
0.318329
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