典型文献
基于可视化聚合酶交联螺旋反应快速检测金黄色葡萄球菌方法的建立
文献摘要：
为建立一种快速检测金黄色葡萄球菌(S.aureus)的新型可视化方法,本研究以S.aureus耐热核酸酶基因(nuc)为靶序列设计特异性引物,对其反应条件进行优化,建立聚合酶交联螺旋反应(PCLSR)可视化检测方法,结果显示,PCLSR法在反应温度62℃,孵育时间60 min、dNTPs浓度为3.0 mmol/L、Bst-DNA聚合酶浓度为10U/管时扩增效果最佳.提取14株金黄色葡萄球菌和9株非金黄色葡萄球菌基因组为模板,利用该方法进行特异性试验,结果显示,PCLSR法能有效检测到14株S.aureus,而对其他9株非S.aureus检测结果均为阴性,特异性良好.10倍倍比稀释S.aureus菌液(1×107cfu/mL～1×100cfu/mL)后提取基因组作为模板,进行敏感性试验,结果显示,PCLSR法与荧光定量PCR法具有相同的敏感性,检测下限均达到1×102cfu/mL,而环介导等温扩增(LAMP)敏感性为1×103cfu/mL,可见该PCLSR敏感性较高.利用该PCLSR、LAMP、细菌培养法和荧光定量PCR法同时检测46份人工污染的生猪肉、灭菌纯牛奶样品中金黄色葡萄球菌,以评价该方法的检测性能,结果显示,PCLSR与荧光定量PCR检测结果与样品符合率为100％,而细菌培养法和LAMP法与样品的符合率仅均为91.67％,可见该PCLSR可以用于临床样品的检测.本研究为动物疾病预防和食品卫生检验等领域快速检测S.aureus提供了新型检测方法.
文献关键词：
金黄色葡萄球菌;聚合酶交联螺旋反应;可视化;快速检测
中图分类号：
作者姓名：
冯瑜菲;袁超文
作者机构：
岭南师范学院生命科学与技术学院,广东 湛江 524048;东北大学生命科学与健康学院,辽宁 沈阳 110006
文献出处：
引用格式：
[1]冯瑜菲;袁超文-.基于可视化聚合酶交联螺旋反应快速检测金黄色葡萄球菌方法的建立)[J].中国预防兽医学报,2022(07):737-742
A类：
聚合酶交联螺旋反应,PCLSR,100cfu,102cfu
B类：
快速检测,金黄色葡萄球菌,aureus,可视化方法,耐热,热核,核酸酶,酶基因,nuc,靶序列,序列设计,特异性引物,反应条件,可视化检测方法,反应温度,孵育时间,dNTPs,Bst,10U,有效检测,菌液,107cfu,敏感性试验,检测下限,环介导等温扩增,LAMP,103cfu,细菌培养法,同时检测,生猪肉,灭菌,纯牛奶,中金,检测性能,符合率,动物疾病预防,食品卫生,卫生检验
AB值：
0.283835
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