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典型文献
西藏环状病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立与应用
文献摘要:
西藏环状病毒(Tibet orbivirus,TIBOV)为2009年在我国西藏新发现的一种环状病毒属病毒,本研究拟建立TIBOV可视化RT-LAMP检测方法.根据我国分离TIBOV(YNSZ/V290/2019)毒株Seg-9基因的保守序列设计2对特异性引物,并引入1对环引物,通过反应条件优化,建立了可视化RT-LAMP检测方法,其最佳反应条件为:64℃50 min.利用该方法对流行性出血病病毒、蓝舌病病毒、中山病病毒、广西环状病毒、阿卡斑病毒、版纳病毒、芒市病毒等虫媒病毒的核酸样品进行检测,仅TIBOV能被检测出,与其他虫媒病毒均无非特异性扩增;灵敏度试验显示该方法的最低可检测限制为18.2拷贝/μL,敏感性是常规RT-PCR的10倍以上.应用建立的RT-LAMP和RT-PCR方法分别对2 596只蠓虫和蚊虫样品核酸进行检测,结果显示,两者阳性检出率分别为3.31%和1.19%,RT-LAMP检出率是RT-PCR的2倍以上.本研究建立的TIBOV可视化RT-LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高、快速等优点,为我国开展TIBOV的现场快速检测与流行病学研究提供了有效技术支持.
文献关键词:
西藏环状病毒;反转录环介等温扩增;可视化检测
作者姓名:
杨振兴;李占鸿;李卓然;李乐;杨恒;牛保生;姚萍芬;朱建波
作者机构:
云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室,云南昆明650224;云南省师宗县动物疫病预防控制中心,云南曲靖655700
文献出处:
引用格式:
[1]杨振兴;李占鸿;李卓然;李乐;杨恒;牛保生;姚萍芬;朱建波-.西藏环状病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立与应用)[J].中国兽医学报,2022(05):892-896,912
A类:
orbivirus,TIBOV,YNSZ,V290,反转录环介等温扩增
B类:
西藏环状病毒,LAMP,建立与应用,Tibet,新发现,拟建,国分,毒株,Seg,保守序列,序列设计,特异性引物,反应条件优化,流行性,出血病,蓝舌病病毒,阿卡斑病毒,版纳病毒,芒市病毒,虫媒病毒,核酸样品,无非,非特异性扩增,检测限,拷贝,蠓虫,蚊虫,阳性检出率,现场快速检测,流行病学研究,有效技术,可视化检测
AB值:
0.280353
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