典型文献
猪细小病毒7型LAMP-LFD快速检测方法的建立及应用
文献摘要：
为了建立一种用于猪细小病毒(PPV)7型的特异、灵敏、快速、简便检测方法,采用环介导等温扩增技术(LAMP)与侧向流动层析试纸(LFD)相结合,根据GenBank发布的PPV7保守区NS1蛋白基因序列设计1套带生物素标签的特异性引物和异硫氰酸(FITC)探针,以PPV7-pET28a重组质粒为阳性模板建立了 PPV7-LAMP-LFD检测方法,对LAMP-LFD的反应温度、反应时间及胶体金标记FITC单克隆抗体(FITTC-mAb)比例进行优化,分析该方法的敏感性和特异性.结果:建立的PPV7-LAMP-LFD检测方法最适反应温度为64℃,最佳反应时间为60 min;标记1mL胶体金需要FTTC-mAb量为15.6pg;该检测方法的最低检测限为1 copies/μL,其灵敏度比琼脂糖凝胶电泳和荧光定量PCR高10倍;对伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、乙型脑炎病毒、猪瘟病毒和PPV1～6型病毒检测为阴性,特异性良好;不同批次引物和探针检测结果一致,重复性好;对86份血样的诊断结果与荧光定量PCR进行比对,LAMP-LFD检测方法的阳性率为9.30％(8/86),检测灵敏度为100％(8/8),特异性为100％(78/78),2种方法的符合率为98.83％(85/86).本研究为PPV7感染的监测与防控提供了技术支撑.
文献关键词：
猪;猪细小病毒;环介导等温扩增;检测试纸
中图分类号：
作者姓名：
柴书军;郭军庆;刘运超;崔燕
作者机构：
甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南郑州 450002
文献出处：
引用格式：
[1]柴书军;郭军庆;刘运超;崔燕-.猪细小病毒7型LAMP-LFD快速检测方法的建立及应用)[J].畜牧与兽医,2022(09):71-77
A类：
PPV7,FITTC,FTTC,6pg,PPV1
B类：
猪细小病毒,LAMP,LFD,快速检测方法,建立及应用,环介导等温扩增技术,侧向流,层析,GenBank,NS1,基因序列,序列设计,生物素,特异性引物,硫氰酸,FITC,pET28a,重组质粒,反应温度,胶体金,金标记,单克隆抗体,mAb,1mL,检测限,copies,琼脂糖凝胶电泳,伪狂犬病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪圆环病毒,乙型脑炎病毒,猪瘟病毒,病毒检测,血样,诊断结果,检测灵敏度,符合率,检测试纸
AB值：
0.255783
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