为了阐明TLR3配体对鸭坦布苏病毒(DTMUV)灭活苗的免疫增强作用,以TLR3配体poly(I:C)和灭活DTMUV作用雏鸭外周血单个核细胞(PMBC),通过体外检测TLR3相关信号蛋白和细胞因子转录及表达水平,明确TLR3配体发挥免疫增强作用的主要信号通路.制备雏鸭PMBC,选择TLR3配体poly(I:C)与灭活DTMUV的不同组和与雏鸭PBMC相互作用,通过SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和间接ELISA方法对细胞因子(IL-6)和干扰素(α-IFN、β-IFN、γ-IFN)的mRNA转录水平和蛋白表达水平进行测定,结果显示各细胞因子和干扰素的mRNA转录水平和蛋白表达均升高.通过SYBR GreenⅠ荧光定量PCR对TLR3相关信号蛋白(TLR3、TRIF、MyD88、NF-κB)的mRNA转录水平测定,结果显示TLR3、TRIF的mRNA转录水平升高显著,MyD88的mRNA转录水平升高不明显.抑制NF-κB的试验组,细胞因子和干扰素mRNA的转录水平显著降低,可见,NF-κB对poly(I:C)+灭活DTMUV组细胞因子和干扰素的产生发挥重要的调节作用.TLR3配体poly(I:C)通过与TLR3结合,激活了TRIF-NF-kB通路,从而引起细胞因子和Ⅰ型干扰素的产生.

坦布苏病毒;TLR3配体poly(I:C);细胞因子;免疫增强机制

山东畜牧兽医职业学院,潍坊 261061;寿光市纪台镇畜牧兽医工作站,寿光262722;青岛市黄岛区农业农村局, 青岛 266400

[1]提金凤;李志杰;王海燕;王莉莉-.体外TLR3配体增强鸭坦布苏病毒灭活苗效果的免疫机制研究)[J].中国动物传染病学报,2022(01):20-29

免疫增强机制

TLR3,鸭坦布苏病毒,病毒灭活,灭活苗,免疫机制,DTMUV,强作用,poly,雏鸭,外周血单个核细胞,PMBC,体外检测,PBMC,SYBR,Green,干扰素,IFN,转录水平,蛋白表达水平,TRIF,MyD88,高显,kB

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