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典型文献
大鼠海马神经细胞VDAC1基因shRNA慢病毒表达载体的构建及干扰效果评价
文献摘要:
目的:构建线粒体电压依赖性阴离子通道(VDAC1)短发卡样RNA重组慢病毒(LV)载体,沉默海马神经细胞VDAC1基因表达,观察所构建的慢病毒载体对海马神经细胞的干扰效果.方法:根据基因库提供的大鼠VDAC1基因的核苷酸序列(序列号为:AB039662.1),设计合成3条LV3-VDAC1-shRNA及1条无义的阴性表达载体;将构建好的慢病毒载体转染到海马神经细胞,按照不同的转染条件对细胞分为空载组、对照(NC)组、病毒组,分别在病毒感染复数(MOI)值在100和10的条件下进行转染;采用荧光定量PCR和Western blot的方法分别检测VDAC1基因在mRNA水平和蛋白水平的表达.结果:与空载组相比,慢病毒感染组的扩增倍数均大于1,VDAC1基因在mRNA水平与蛋白水平表达均明显升高(P<0.05);与对照组相比,病毒感染复数(MOI)=10与MOI=100之间没有显著差异(P>0.05);PCR结果与Western blot结果综合来看,VDAC1转录水平表达越高,蛋白水平表达越低,呈现反向关联的状态.结论:三种慢病毒对海马神经细胞都有干扰效果,VDAC1基因的mRNA表达和蛋白表达是一种反向关联的状态.
文献关键词:
VDAC1;慢病毒;转染;海马神经细胞;大鼠
作者姓名:
郑刘晔;奚用勇;张晗;蒋与刚
作者机构:
军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所,天津300050;蚌埠医学院,蚌埠233000;杭州医学院临床学院,杭州310000;郑州大学,郑州450001
引用格式:
[1]郑刘晔;奚用勇;张晗;蒋与刚-.大鼠海马神经细胞VDAC1基因shRNA慢病毒表达载体的构建及干扰效果评价)[J].中国应用生理学杂志,2022(05):430-433
A类:
AB039662
B类:
海马神经细胞,VDAC1,shRNA,慢病毒表达载体,干扰效果,电压依赖性阴离子通道,短发,发卡,重组慢病毒,观察所,慢病毒载体,基因库,序列号,设计合成,LV3,无义,建好,转染,空载,NC,病毒组,复数,MOI,blot,慢病毒感染,倍数,蛋白水平表达,转录水平
AB值:
0.228218
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