目的 探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对子宫肌瘤平滑肌细胞增殖和分化的影响.方法 通过Western blot和qRT-PCR检测30例子宫肌瘤组织以及邻近正常子宫肌层组织中的PEDF表达.分离、培养、鉴定子宫平滑肌细胞后,将子宫平滑肌细胞分为5组:对照组、pLenti6.3-NC组、PEDF-pLenti6.3组、shRNA-NC组、shRNA-PEDF组.对照组细胞不进行转染,pLenti6.3-NC组细胞转染阴性对照慢病毒(pLenti6.3-NC),PEDF-pLenti6.3组细胞转染过表达PEDF的重组慢病毒(PEDF-pLenti6.3),shRNA-NC组细胞转染阴性对照shRNA(shRNA-NC),shRNA-PEDF组细胞转染靶向PEDF基因序列的短发夹RNA(shRNA-PEDF).通过Western blot和qRT-PCR检测子宫平滑肌细胞中的PEDF表达.采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)和EdU染色试剂盒检测细胞增殖,使用一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡.通过qRT-PCR或Western blot检测PEDF、ERα、ERβ、SM22α、α-SMA、Bcl-2、cleaved Caspase-3、PI3K、total-AKT和p-AKT的表达.结果 与正常子宫肌层组织和细胞相比,子宫肌瘤组织和细胞中PEDF的mRNA和蛋白水平均降低(P<0.05).与pLenti6.3-NC组相比,PEDF-pLenti6.3组的细胞相对活力和EdU阳性率降低,TUNEL阳性率升高(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量降低(P<0.05),cleaved Caspase-3蛋白相对表达量升高(P<0.05).与pLenti6.3-NC组相比,PEDF-pLenti6.3组子宫肌瘤平滑肌细胞SM22α、α-SMA、ERα、ERβ、PI3K和p-AKT蛋白相对表达量均降低(P<0.05).与shRNA-NC组相比,shRNA-PEDF组细胞的相对活力和EdU阳性率升高(P<0.05),TUNEL阳性率降低(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量升高(P<0.05),cleaved Caspase-3蛋白相对表达量降低(P<0.05).与shRNA-NC组相比,shRNA-PEDF组SM22α、α-SMA、ERα、ERβ、PI3K和p-AKT蛋白相对表达量均升高(P<0.05).各组total-AKT蛋白相对表达量无显著差异(P>0.05).结论 PEDF在子宫肌瘤中被抑制,上调PEDF可抑制子宫肌瘤平滑肌细胞的增殖和分化,并诱导细胞凋亡,其机制部分是通过PI3 K/AKT信号通路介导的.

色素上皮衍生因子;子宫肌瘤;增殖;分化;凋亡;PI3K/AKT信号通路

吴娟;姜珏;王志芳;刘瑾华;吴金萍;李妙妮;杨丽娜

兵器工业五二一医院妇科,西安 710065;西安交通大学第二附属医院超声科

山西医科大学学报

[1]吴娟;姜珏;王志芳;刘瑾华;吴金萍;李妙妮;杨丽娜-.色素上皮衍生因子对子宫肌瘤平滑肌细胞增殖和分化的影响)[J].山西医科大学学报,2022(04):403-413

pLenti6

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