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雄激素受体基因慢病毒干扰载体的构建及在肝癌细胞中的表达
文献摘要:
目的:构建敲减人雄激素受体(AR)基因的慢病毒质粒,转染Hep3B细胞使其表达目的蛋白并探索其对PTEN、p-AKT蛋白表达的影响.方法:设计合成3对针对AR基因特异性敲减的寡核苷酸片段,分别连接于重组慢病毒载体pLKO.1,构建3条AR干扰载体.利用验证正确的3个慢病毒载体转染293T细胞得到慢病毒上清液.采用RT-PCR和Western blot在5株肝癌细胞中挑选AR高表达的细胞系进行AR慢病毒上清液感染.RT-PCR和Western blot检测3条AR干扰质粒在Hep3B细胞内的表达及其对PTEN、p-AKT蛋白表达的作用.结果:测序鉴定证实3条AR慢病毒干扰载体构建成功,干扰Hep3B细胞后,RT-PCR和Western blot结果显示其中1条AR干扰后的mRNA和蛋白表达明显降低,细胞内PTEN蛋白表达升高,p-AKT表达降低.结论:成功构建3条AR干扰载体,其中1条干扰效率较高,能在Hep3B细胞中干扰AR的表达,感染细胞后上调抑癌基因PTEN的蛋白表达对p-AKT有抑制作用,提示AR和PTEN/AKT信号通路可能具有相关性.
文献关键词:
雄激素受体;慢病毒干扰;PTEN;肝癌
中图分类号:
作者姓名:
陆灵松;沈梅玲;祝珊珊;刘敏;毕丽伟;李海浪;秦飞;李杰
作者机构:
厦门医学院药学系药物检测中心,厦门361026;厦门医学院基础医学部,厦门361026
文献出处:
引用格式:
[1]陆灵松;沈梅玲;祝珊珊;刘敏;毕丽伟;李海浪;秦飞;李杰-.雄激素受体基因慢病毒干扰载体的构建及在肝癌细胞中的表达)[J].中国免疫学杂志,2022(11):1306-1310
A类:
B类:
雄激素受体基因,慢病毒干扰,干扰载体,肝癌细胞,敲减,减人,病毒质,质粒,转染,Hep3B,目的蛋白,PTEN,AKT,设计合成,因特,寡核苷酸,重组慢病毒,慢病毒载体,pLKO,293T,上清液,blot,细胞系,载体构建,条干,抑癌基因
AB值:
0.229901
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