典型文献
在hUCMSCs中过表达Shox2和HCN4以构建生物起搏表型细胞的研究
文献摘要：
目的:拟利用慢病毒载体将Shox2和HCN4转染至永生化人脐带间充质干细胞(hUCMSCs),探讨体外过表达Shox2和HCN4的hUCMSCs是否具有起搏样细胞表型.方法:进行hUCMSCs体外传代培养.分别构建携带Shox2和HCN4基因的慢病毒载体及空载体,通过慢病毒介导Shox2和HCN4基因转染至hUCMSCs.采用CCK-8实验检测各组细胞活力.应用RT-qPCR和Western blot方法检测起搏相关因子mRNA和蛋白表达水平.结果:(1)慢病毒过表达载体构建成功,Shox2-MSCs组和HCN4-MSCs组转染效率约为50％～55％,Shox2-HCN4-MSCs组转染效率约40％～45％,形态较前也稍有变化,折光性较好;(2)实验组细胞生长速度较对照组变缓(P<0.05);(3)过表达组中HCN4、Tbx18和Tbx3的mRNA表达量显著高于对照组(P<0.05),Nkx2.5和Cx43的mRNA表达量显著低于对照组(P<0.01);(4)与对照组相比,单基因过表达组Cx45蛋白水平显著上调,Nkx2.5和Cx43蛋白水平显著下调(P<0.01),双基因过表达组比单基因过表达组上调(或下调)更显著(P<0.01).结论:过表达Shox2和(或)HCN4的hUCMSCs具有起搏样细胞表型;共转染有促进hUCMSCs向起搏样细胞表型转化的叠加效果.
文献关键词：
生物起搏器;人脐带间充质干细胞;Shox2基因;HCN4基因
中图分类号：
作者姓名：
韦玮;朱业;顾建军;顾翔
作者机构：
扬州大学临床医学院,苏北人民医院心血管内科,江苏扬州225001
文献出处：
引用格式：
[1]韦玮;朱业;顾建军;顾翔-.在hUCMSCs中过表达Shox2和HCN4以构建生物起搏表型细胞的研究)[J].中国病理生理杂志,2022(09):1592-1599
A类：
Tbx18,Tbx3,Cx45,生物起搏器
B类：
hUCMSCs,Shox2,HCN4,慢病毒载体,永生化,人脐带间充质干细胞,外传,传代培养,空载,过慢,基因转染,CCK,实验检测,细胞活力,qPCR,blot,相关因子,蛋白表达水平,过表达载体,表达载体构建,转染效率,有变,折光,细胞生长速度,Nkx2,Cx43,单基因,基因过表达,双基,共转染,染有,细胞表型转化
AB值：
0.201111
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