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新型冠状病毒E基因真核表达载体的构建及表达
文献摘要：
囊膜蛋白(E蛋白)是新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus-2,SARS-CoV-2)的小包膜蛋白,在调控冠状病毒复制方面有重要作用.为了更有利地研究SARS-CoV-2 E蛋白的生物学功能,研究成功构建了SARS-CoV-2 E基因的真核表达载体.首先,通过PCR技术扩增SARS-CoV-2 E基因,并将pCMV-Myc载体进行双酶切.随后,利用同源重组将SARS-CoV-2 E基因连接至pCMV-Myc载体.经酶切和测序鉴定发现,SARS-CoV-2 E基因成功克隆至pCMV-Myc载体中,并将重组质粒命名为pCMV-Myc-SARS-CoV-2-E.将重组质粒pCMV-Myc-SARS-CoV-2-E转染至HEK-293T细胞,利用Western Blot和间接免疫荧光技术检测重组质粒的表达以及定位情况.结果表明,重组质粒pCMV-Myc-SARS-CoV-2-E在HEK-293T细胞中成功表达,并且发现重组蛋白主要分布于胞质,少量存在于胞核,为进一步研究SARS-CoV-2 E蛋白的功能奠定基础.
文献关键词：
新型冠状病毒;E基因;真核载体构建;蛋白表达
中图分类号：
作者姓名：
于雯;郑亮;王宏宇;高鑫誉;吴志军;曹宏伟;张华
作者机构：
黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学生物技术中心;黑龙江八一农垦大学动物科技学院
文献出处：
引用格式：
[1]于雯;郑亮;王宏宇;高鑫誉;吴志军;曹宏伟;张华-.新型冠状病毒E基因真核表达载体的构建及表达)[J].黑龙江八一农垦大学学报,2022(05):85-91
A类：
真核载体构建
B类：
真核表达载体,囊膜蛋白,Severe,Acute,Respiratory,Syndrome,Coronavirus,SARS,CoV,小包,包膜蛋白,病毒复制,生物学功能,pCMV,Myc,双酶,同源重组,重组质粒,转染,HEK,293T,Blot,间接免疫荧光,免疫荧光技术,重组蛋白
AB值：
0.278823
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