目的 探究舒洛地特(SDX)通过调节NLRP3表达对视网膜Müller细胞凋亡的影响.方法 将24只清洁级C57BL/6小鼠随机数字表法分为4组,正常组、DR组、DR+DMSO组、DR+SDX组,各6只.除正常组小鼠外,均采用腹膜内注射链脲佐菌素(STZ)诱导实验性糖尿病视网膜病变(DR)模型.正常组小鼠,标准饲料喂养;DR组模型小鼠42％高脂肪饮食;DR+DMSO组模型小鼠2％高脂肪饮食+1 mL·kg-1·d-10.1％DMSO,DR+SDX组模型小鼠42％高脂肪饮食+1 g·kg-1·d-1 SDX,连续干预21 d.通过蛋白质印迹法检测NLRP3炎症小体(免疫受体NLRP3、接头蛋白ASC和蛋白酶caspase-1)和促炎因子白细胞介素(IL)-1β的表达水平.然后从小鼠眼组织分离原代视网膜Müller细胞,分别在正常葡萄糖(NG组,5 mmol/L)或高糖葡萄糖(HG组,30 mmol/L)培养,用NLRP3炎症小体抑制剂MCC950(10μmol/L)处理24 h(HG+MCC950组),并用5 mmol/L NLRP3激动剂三磷酸腺苷(ATP)处理30 min(HG+SDX+ATP组)或使用1 mmol/L活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理24 h(HG+NAC组),并用活性氧200μmol/L激动剂叔丁基过氧化氢(TBHP)处理最后3 h(HG+SDX+TBHP组),通过ELSIA检测氧化应激标志物活性氧、丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)和Müller细胞培养上清液中的血管内皮生长因子(VEGF)、造血生长因子(HGF)的表达水平.结果(1)与正常组相比,DR组NLRP3蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与DR组和DR+DMSO组相比,DR+SDX组NLRP3蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05).(2)与正常组相比,DR组ASC、cleavedcaspase-1/pro-caspase-1、cleaved IL-1β/pro-IL-1β水平均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与DR组和DR+DMSO组相比,DR+SDX组NLRP3以上指标表达均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05).(3)与NG组相比,HG组和HG+DMSO组Müller细胞和培养液中VEGF和HGF均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与HG和HG+DMSO组相比,HG+MCC950和HG+SDX组细胞和培养液中VEGF和HGF均显著降低,而HG+SDX+ATP则显著高于HG+SDX组,差异均有统计学意义(P<0.05).(4)与NG组相比,HG组和HG+DMSO组Müller细胞活性氧活性和丙二醛含量均显著增加,SOD活性则显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与HG和HG+DMSO组相比,HG+NAC和HG+SDX组细胞中活性氧活性和丙二醛含量均显著降低,SOD活性则显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与HG+SDX组相比,HG+SDX+TBHP组活性氧活性和丙二醛含量均显著增加,SOD活性则显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 舒洛地特可通过抑制活性氧/NLRP3炎症小体信号转导来减轻高血糖诱导的Müller细胞增殖和促血管生成因子的产生.

小鼠;舒洛地特;NLRP3;糖尿病视网膜病变;Müller细胞;神经毒性

尹晓艳;董永孝;刘彦章;薛涛

咸阳市第一人民医院 白内障屈光中心 陕西 咸阳 712000;咸阳市第一人民医院 综合眼病科 陕西 咸阳 712000

临床和实验医学杂志

[1]尹晓艳;董永孝;刘彦章;薛涛-.舒洛地特通过调节NLRP3表达对视网膜Müller细胞凋亡的影响)[J].临床和实验医学杂志,2022(10):1013-1017

DR+DMSO,DR+SDX,HG+MCC950,HG+SDX+ATP,HG+NAC,HG+SDX+TBHP,HG+DMSO,HG+SDX

舒洛地特,NLRP3,对视,ller,C57BL,腹膜,链脲佐菌素,STZ,实验性,糖尿病视网膜病变,喂养,模型小鼠,高脂肪,+1,蛋白质印迹法,炎症小体,接头,头蛋白,ASC,促炎因子,眼组织,组织分离,原代,NG,高糖,激动剂,三磷酸腺苷,活性氧清除,清除剂,乙酰半胱氨酸,用活,叔丁基过氧化氢,ELSIA,细胞培养,养上,上清液,血管内皮生长因子,VEGF,造血,HGF,蛋白表达水平,平降,cleavedcaspase,pro,培养液,细胞活性,丙二醛含量,抑制活性,信号转导,高血糖,促血管生成因子,神经毒性

0.175467