目的 探讨刺槐素对尼日利亚菌素(Nigericin)诱导的小鼠骨髓巨噬细胞(BMDM)含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)炎症小体活化的影响.方法 分离并培养小鼠BMDM细胞,将BMDM细胞随机分为空白对照组、LPS组、LPS+Nigericin组、LPS+2.5μmol/L刺槐素+Nigericin组、LPS+5μmol/L刺槐素+Nigericin组和LPS+10μmol/L刺槐素+Nigericin组.除空白对照组外,其他各组加入LPS(50 ng/mL)处理3 h,除空白对照组、LPS组外其他各组继续加入2.5、5、10μmol/L刺槐素处理0.5 h,然后加入刺激剂10μmol/L的Nigericin处理0.5 h.用Western blotting法检测裂解液中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1前体(Pro-caspase-1)、白细胞介素-1β前体(Pro-IL-1β)和上清液中caspase-1、IL-1β蛋白表达,提示NLRP3炎症小体活化情况;用ELISA法检测上清液中NLRP3炎症小体活化后炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α释放情况;用乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒检测细胞上清液LDH活性,提示NLRP3炎症小体活化后细胞死亡情况.结果 各组细胞裂解液中Pro-caspase-1、Pro-IL-1β蛋白表达比较差异无统计学意义(P均>0.05);与空白对照组比较,LPS+Nigericin组上清液中caspase-1、IL-1β蛋白表达高,上清液IL-1β、IL-18、TNF-α水平及LDH活性高(P均<0.05).与LPS+Nigericin组比较,LPS+2.5μmol/L刺槐素+Nigericin组、LPS+5μmol/L刺槐素+Nigericin组、LPS+10μmol/L刺槐素+Nigericin组上清液caspase-1、IL-1β蛋白表达及IL-1β、TNF-α水平逐渐降低(P均<0.05);LPS+5μmol/L刺槐素+Nigericin组、LPS+10μmol/L刺槐素+Nigericin组LDH活性低(P均<0.05),LPS+2.5μmol/L刺槐素+Nigericin组、LPS+5μmol/L刺槐素+Nigericin组、LPS+10μmol/L刺槐素+Nigericin组LDH活性比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 刺槐素能有效抑制Nigericin诱导的小鼠BMDM骨髓巨噬细胞NLRP3炎症小体的活化.

刺槐素;含NLR家族Pyrin域蛋白3炎症小体;尼日利亚菌素;巨噬细胞;小鼠

补娟;史深;周玲;张晓玲;叶勒丹·马汉;朱沂

新疆维吾尔自治区人民医院医学研究与转化中心,乌鲁木齐830001;新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心;新疆维吾尔自治区人民医院神经内科

山东医药

[1]补娟;史深;周玲;张晓玲;叶勒丹·马汉;朱沂-.刺槐素对Nigericin诱导小鼠骨髓巨噬细胞NLRP3炎症小体活化的影响)[J].山东医药,2022(07):10-13,49

LPS+Nigericin,+Nigericin,LPS+5

刺槐素,巨噬细胞,NLRP3,炎症小体,尼日利亚菌素,BMDM,Pyrin,空白对照,LPS+2,LPS+10,素处理,刺激剂,blotting,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶,Pro,caspase,上清液,放情,乳酸脱氢酶,LDH,试剂盒,细胞死亡,死亡情况,表达比较

0.110254