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UNcle高通量蛋白稳定系统分析3种反转录酶
文献摘要：
目的:反转录酶的热稳定性是重要的质控参数,利用UNcle高通量蛋白稳定分析仪多种检测功能对反转录酶热稳定性进行表征.方法:比较qRT-PCR方法及UNcle系统对3种反转录酶的热稳定检测,并利用UNcle荧光光谱分析核苷类反转录酶抑制剂去羟肌苷对反转录酶的影响.结果:利用高通量蛋白稳定性分析系统UNcle进行反转录酶熔解温度Tm、聚集起始温度Tagg及蛋白均一度分析.和qRT-PCR检测结果相比,3种反转录酶的热稳定性顺序一致,但各自检测的Tm数值差距较大.比较这两种方法的前处理,UNcle不需要外源添加染料,即没有引入外来变量直接检测,可以更加准确反映反转录酶本身的Tm值.结论:提供了一种新的快速准确表征反转录酶热稳定性的方法,为反转录酶的研发质控提供重要检测依据,并为UNcle在其他蛋白的热稳定分析提供借鉴参考意义.
文献关键词：
反转录酶;蛋白热稳定性;核苷类逆转录酶抑制剂;去羟肌苷
中图分类号：
作者姓名：
武瑶;安琳
作者机构：
中国科学院微生物研究所,北京100101
文献出处：
引用格式：
[1]武瑶;安琳-.UNcle高通量蛋白稳定系统分析3种反转录酶)[J].分析仪器,2022(02):64-72
A类：
UNcle,去羟肌苷,Tagg
B类：
稳定系统,反转录酶,质控,稳定分析,qRT,定检,荧光光谱,光谱分析,稳定性分析,熔解,Tm,均一,自检测,前处理,外源添加,染料,来变,直接检测,快速准确,蛋白热稳定性,核苷类逆转录酶抑制剂
AB值：
0.178015
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