典型文献
山羊隐花色素2基因真核表达载体的构建及生物信息学分析
文献摘要：
为了构建山羊隐花色素2(CRY2)基因的真核表达载体,分析CRY2蛋白的基本特性,本试验采用逆转录PCR扩增山羊CRY2基因的编码序列(CDS),并以同源重组的方式将其连接至pcDNA3.1-Puro-N-3HA载体,获得pcDNA3.1-3HA-gCRY2重组质粒.酶切和测序鉴定后将重组质粒转染至HEK293T细胞,采用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测山羊CRY2基因在mRNA和蛋白水平的表达变化;同时利用生物信息学软件对CRY2蛋白的基本理化性质和功能进行预测和分析.结果显示:pcDNA3.1-3HA-gCRY2重组质粒的酶切和测序结果与预期一致;转染HEK293T细胞后,pcDNA3.1-3HA-gCRY2转染组CRY2 mRNA的相对表达量比pcDNA3.1-Puro-N-3HA转染组高600倍左右(P＜0.001),CRY2蛋白成功表达;山羊、小鼠和人等哺乳动物CRY2基因CDS区具有较高的相似性;CRY2蛋白不存在信号肽和跨膜区,预测显示其可能与ARNTL、CLOCK、PER1和PER2等蛋白互作.结果表明,本试验成功构建了山羊CRY2基因的真核表达载体,并预测分析了山羊CRY2蛋白的基本理化特性,为探究山羊CRY2基因及其编码蛋白的生物学功能提供了科学依据.
文献关键词：
山羊;隐花色素2;昼夜节律;载体构建;生物信息学
中图分类号：
作者姓名：
马白荣;张海森;高登科;李超;靳亚平;陈华涛
作者机构：
西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物医学院农业农村部动物生物技术重点实验室,陕西杨凌712100
文献出处：
引用格式：
[1]马白荣;张海森;高登科;李超;靳亚平;陈华涛-.山羊隐花色素2基因真核表达载体的构建及生物信息学分析)[J].中国兽医杂志,2022(05):1-9
A类：
3HA,gCRY2
B类：
山羊,隐花色素,真核表达载体,生物信息学分析,基本特性,逆转录,编码序列,CDS,同源重组,pcDNA3,Puro,重组质粒,质粒转染,HEK293T,蛋白免疫印迹,印迹技术,表达变化,利用生物,生物信息学软件,基本理化性质,相对表达量,哺乳动物,信号肽,ARNTL,CLOCK,PER1,PER2,蛋白互作,预测分析,理化特性,编码蛋白,生物学功能,昼夜节律,载体构建
AB值：
0.237513
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