典型文献
鸡c-myc原癌基因反义RNA的鉴定及其抗ALV-J能力的分析
文献摘要：
原癌基因c-myc被鉴定为J亚群禽白血病病毒(ALV-J)诱导髓样细胞瘤的常见整合位点,其异常激活可能是ALV-J最重要的分子致病机制.为了鉴定c-myc反义RNA对c-myc基因表达的影响及其在ALV-J增殖中的作用,本研究通过cDNA末端快速扩增(RACE)技术、PCR扩增5'-race和3'-race后对其编码属性的分析鉴定结果显示,鸡c-myc原癌基因反义RNA全长621 bp,且不编码蛋白;该反义RNA序列定位于鸡2号染色体,且源自c-myc外显子3反向序列,因此将其命名为ch-MYC-AS1.将ch-MYC-AS1连接载体pcDNA3.1,构建真核表达质粒pcDNA3.1-ch-MYC-AS1,将其转染至鸡巨噬细胞细胞系HD11,培养48 h后利用荧光定量PCR和western blot检测ch-MYC-AS1过表达对c-myc表达的影响,结果显示,过表达ch-MYC-AS1可以显著抑制c-myc原癌基因在HD11中的表达.以MOI5的ALV-J(JS09GY3株)感染HD11细胞4h后,将pcDNA3.1-ch-MYC-AS1质粒转染该细胞,48h后采用IDEXX禽白血病抗原检测试剂盒检测细胞上清中ALV-Jp27蛋白的表达水平,结果显示过表达ch-MYC-S1显著减少细胞上清中ALV-J p27蛋白的表达;进一步通过荧光定量PCR、western blot检测过表达ch-MYC-AS1对ALV-J复制的影响,结果显示,ALV-J env基因mRNA转录水平和蛋白表达水平在ch-MYC-AS1转染后48 h的HD11细胞中均显著下调(P＜0.01);利用间接免疫荧光技术检测DF-1细胞上清中ALV-J的病毒效价,结果显示:与对照组相比,HD11细胞上清中ALV-J的病毒效价在ch-MYC-AS1转染后48 h明显降低.上述结果表明过表达ch-MYC-AS1可以显著抑制ALV-J在HD11细胞中的增殖.本研究首次揭示了原癌基因c-myc反义RNA的抗病毒功能,为进一步探究c-myc基因在ALV-J致病机理中的作用提供了参考依据.
文献关键词：
c-myc原癌基因;反义RNA;禽白血病病毒;巨噬细胞
中图分类号：
作者姓名：
骆欢;张瑾麒;朱姝桐;柴文娴;陈绪靖;陈世豪;耿拓宇;崔恒宓;胡序明
作者机构：
扬州大学动物科学与技术学院/表观遗传学及表观基因组学研究所,江苏 扬州 225009;扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室,江苏 扬州 225009;常州市动物疫病预防控制中心,江苏 常州 213002
文献出处：
引用格式：
[1]骆欢;张瑾麒;朱姝桐;柴文娴;陈绪靖;陈世豪;耿拓宇;崔恒宓;胡序明-.鸡c-myc原癌基因反义RNA的鉴定及其抗ALV-J能力的分析)[J].中国预防兽医学报,2022(01):59-65
A类：
MOI5,JS09GY3,Jp27
B类：
myc,原癌基因,反义,ALV,亚群,禽白血病病毒,髓样细胞,整合位点,致病机制,RACE,race,分析鉴定,全长,bp,编码蛋白,序列定位,外显子,ch,MYC,AS1,pcDNA3,真核表达质粒,巨噬细胞,细胞系,HD11,western,blot,过表达,4h,质粒转染,48h,IDEXX,抗原检测,检测试剂盒,上清,env,转录水平,蛋白表达水平,间接免疫荧光,免疫荧光技术,DF,效价,抗病毒,致病机理
AB值：
0.218458
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