目的:探讨Pim1在巨噬细胞M1型极化中的作用及M1型巨噬细胞对内皮细胞黏附分子表达的影响,并观察其在ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)形成中的作用.方法:采用脂多糖(LPS)刺激小鼠Raw264.7细胞建立M1型巨噬细胞模型,用Pim1特异性抑制剂SMI-4a和转染Pim1小干扰RNA(siPim1)进行干预,分为对照组、LPS组、LPS+SMI-4a组、LPS+siNC组和LPS+siPim1组.收集以上各组Raw264.7细胞上清作为条件培养液(CM)孵育原代培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为CMM0、CMM1、CMSMI-4a、CMsiNC和CMsiPim1组.动物采用颈动脉部分结扎术建立颈动脉AS模型,用6周龄ApoE-/-雄性小鼠18只建模后,随机分为模型组及SMI-4a干预组,每组各9只.采用油红O染色法观察颈动脉脂质蓄积变化.免疫荧光法和Western blot法检测M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、Pim1、血管内皮标志物血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、细胞间黏附分子1(ICAM1)和血管细胞黏附分子1(VCAM1)在血管壁和细胞中的表达变化.结果:与对照组相比,LPS显著上调了Raw264.7细胞M1型极化标志物iNOS蛋白表达(P<0.01),同时Pim1蛋白表达也显著增高(P<0.05);SMI-4a干预和siPim1转染Raw264.7细胞,显著抑制LPS诱导的Pim1和iNOS表达(P<0.05或P<0.01).与CMM0相比,CMM1显著上调HUVEC中ICAM1和VCAM1蛋白表达(P<0.05或P<0.01);CMSMI-4a和CMsiPim1均显著抑制了HUVECs中ICAM1和VCAM1表达(P<0.01).动物实验水平,建模后结扎侧左颈动脉可见脂质沉积,有AS斑块形成,血管壁iNOS表达显著增多(P<0.01),Pim1、ICAM1和VCAM1蛋白表达上调(P<0.05).SMI-4a干预后,与模型组相比,左颈动脉脂质沉积被抑制,Pim1和iNOS表达显著降低(P<0.05或P<0.01),血管内皮标志物VE-cadherin蛋白水平升高(P<0.05),同时ICAM1和VCAM1蛋白表达显著下降(P<0.01).结论:抑制Pim1可以抑制ApoE-/-小鼠AS斑块形成,其机制可能与减少巨噬细胞M1型极化,降低内皮细胞炎症反应有关.

Pim1蛋白;M1型巨噬细胞;炎症;动脉粥样硬化

钟耕瑞;付萌萌;王小波;王汉琴

湖北医药学院基础医学院解剖学教研室,湖北十堰442000;湖北医药学院附属随州医院转化医学研究中心,湖北随州441300

中国病理生理杂志

[1]钟耕瑞;付萌萌;王小波;王汉琴-.Pim1调控巨噬细胞M1型极化介导血管内皮细胞炎症在ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化中的作用)[J].中国病理生理杂志,2022(12):2113-2121

siPim1,LPS+SMI,LPS+siPim1,CMM0,CMM1,CMSMI,CMsiNC,CMsiPim1

巨噬细胞,血管内皮细胞,细胞炎症,ApoE,动脉粥样硬化,AS,脂多糖,Raw264,细胞模型,4a,转染,小干扰,LPS+siNC,上清,条件培养液,孵育,原代培养,人脐静脉内皮细胞,HUVECs,颈动脉,结扎术,周龄,雄性小鼠,用油,染色法,脂质蓄积,免疫荧光法,blot,诱导型一氧化氮合酶,iNOS,血管内皮钙黏蛋白,cadherin,细胞间黏附分子,ICAM1,血管细胞黏附分子,VCAM1,血管壁,表达变化,动物实验,斑块形成,动脉脂质沉积

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