目的:研究α-2,6-唾液酸转移酶Ⅰ(ST6GalⅠ)对巨噬细胞极化的影响并探究其对肾透明细胞癌的作用.方法:免疫组织化学染色与实时荧光定量PCR检测肾透明细胞癌中ST6GalⅠ表达,利用脂质体法转染siRNA-ST6GalⅠ至THP-1细胞,50 ng/ml PMA与20 ng/ml IL-4诱导转染后的THP-1细胞,实时荧光定量PCR和流式细胞术检测巨噬细胞极化情况.建立巨噬细胞与786-O细胞共培养体系,MTT法和流式细胞术检测细胞的存活与凋亡,细胞划痕实验检测细胞迁移变化,ELISA检测细胞上清液中炎症相关因子含量,Western blot检测T细胞免疫球蛋白黏蛋白-1(TIM-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果:肾透明细胞癌组织中ST6GalⅠ表达较癌旁组织明显升高(P<0.01);与对照组比较,siRNA-ST6GalⅠ组THP-1细胞中ST6GalⅠmRAN和蛋白相对表达量均显著下降(P<0.05);与对照组比较,THP-1细胞经诱导后Arg-1 mRNA表达升高,iNOS mRNA表达下降,CD206表达升高(P<0.05),而转染siRNA-ST6GalⅠ后进行诱导处理的THP-1细胞Arg-1 mRNA表达下降,iNOS mRNA表达升高,CD206表达下降(P<0.05);786-O细胞与诱导的THP-1细胞共培养后,细胞存活率升高,迁移能力增强,凋亡率下降,细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量下降,IL-10、TGF-β1含量升高,TIM-1蛋白表达下降,VEGF蛋白表达升高(P<0.05);而786-O细胞与下调ST6GalⅠ且诱导的THP-1细胞共培养后,细胞存活率下降,迁移能力降低,凋亡率增加,同时,细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量升高,IL-10、TGF-β1含量下降,TIM-1蛋白表达升高而VEGF蛋白表达下降(P<0.05).结论:下调ST6GalⅠ表达可抑制THP-1细胞向M2型巨噬细胞极化,进而抑制肾透明细胞癌细胞的生长与迁移,并调控炎症因子与免疫相关蛋白TIM-1、VEGF的表达.

肾透明细胞癌;唾液转移酶Ⅰ;巨噬细胞;免疫功能

李前进;王玉杰;刘强;马双钰;拜合提亚·阿扎提

新疆医科大学第一附属医院泌尿外科,乌鲁木齐830054

中国免疫学杂志

[1]李前进;王玉杰;刘强;马双钰;拜合提亚·阿扎提-.基于巨噬细胞极化探究唾液酸转移酶Ⅰ(ST6GalⅠ)对肾透明细胞癌生长及免疫功能的影响)[J].中国免疫学杂志,2022(16):1927-1934

ST6Gal

巨噬细胞极化,唾液酸,转移酶,肾透明细胞癌,生长及免疫,免疫组织化学染色,脂质体法,转染,siRNA,THP,ml,PMA,流式细胞术,细胞共培养,共培养体系,MTT,细胞划痕实验,实验检测,细胞迁移,上清液,炎症相关因子,blot,细胞免疫,免疫球蛋白,黏蛋白,TIM,血管内皮生长因子,VEGF,癌组织,癌旁组织,mRAN,白相,相对表达量,Arg,iNOS,CD206,细胞存活率,迁移能力,凋亡率,TGF,可抑制,M2,癌细胞,免疫相关

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